Artykuł przeglądowy Review
Uwzględniająca specyfikę weterynaryjną charakte-rystyka rodziny Coronaviridae, czyli koronawirusów, i wywoływanych przez nie chorób została ostatnio (2011 r.) przedstawiona przez Quinna i wsp. (24). Do niej nawiązano w niniejszym opracowaniu, z wyko-rzystaniem również licznych innych publikacji i przy koncentracji na gatunkach koronawirusów chorobo-twórczych dla świń oraz wywoływanych przez nie chorobach.
Wirus i jego klasyfikacja
Coronaviridae są pleomorficzne, posiadają otoczkę,
a jako materiał genetyczny jednoniciowy RNA o do-datniej polarności (24). Wystające z otoczki wypustki tworzą obraz otaczającej wirus korony, co zadecy-dowało o nazwie rodziny Coronaviridae. Białko S jest główną komponentą antygenową, która indukuje wytwarzanie przeciwciał neutralizujących zakażający koronawirus w czasie naturalnej infekcji.
U świń zidentyfikowano 4 koronawirusy: wirus zakaźnego zapalenia żołądka i jelit (transmissible gastroenteritis virus, TGEV); koronawirus układu oddechowego świń (porcine respiratory coronavirus, PRCV), mutant TGEV; wirus epidemicznej biegunki świń (porcine epidemic diarrhea virus, PEDV); hema-glutynujący wirus zapalenia mózgu i rdzenia świń (por-cine hemagglutinating encephalomyelitis virus, HEV).
Wymienione koronawirusy zaszeregowane zosta-ły do podrodziny Coronavirinae wchodzącej, obok podrodziny Torovirinae, w skład rodziny Corona-
viridae. Podrodzina Coronavirinae zawiera 3
ro-dzaje: Alphacoronavirus, Betacoronavirus i Gam-
macoronavirus. Do rodzaju Alphacoronavirus
za-liczono: TGEV i PRCV oraz PEDV, a do rodzaju
Betacoronavirus HEV. Szczegółowe dane na temat
właściwości wymienionych czynników etiologicznych i wywoływanych u świń chorób przedstawiają Quinn i wsp. (24) oraz Saif i wsp. (26).
TGE i infekcja wywołana przez PRCV
Ze względu na przedstawienie objawów klinicznych, zmian patologicznych oraz procedur zwalczania TGE w szeregu wcześniejszych publikacji (19, 22, 26) oraz z uwagi na nie występowanie – lub sporadyczne pojawianie się – obecnie tej choroby w Europie, jak też na innych kontynentach, a częste stwierdzanie mutanta TGE, czyli PRCV, bardziej szczegółowo zo-stanie omówiona wywoływana przez niego infekcja, z uwzględnieniem testów laboratoryjnych odróżniają-cych TGEV od PRCV.
Przebieg wywołanej przez PRCV infekcji jest często subkliniczny. Objawy kliniczne – o ile wystąpią – wy-rażają się depresją i/lub utratą apetytu oraz ewentualnie opóźnionym wzrostem prosięcia (31). PRCV może
Koronawirusy i wywoływane przez nie choroby świń
MARIAN TRUSZCZYŃSKI, ZYGMUNT PEJSAK
Zakład Chorób Świń, Państwowy Instytut Weterynaryjny – Państwowy Instytut Badawczy w Puławach, Al. Partyzantów 57, 24-100 Puławy
Otrzymano 14.10.2013 Zaakceptowano 14.11.2013
Truszczyński M., Pejsak Z.
Coronaviruses and diseases which they cause in swine Summary
This review is characterizing the 4 following Coronaviruses, being etiological agents of correspondent diseases occurring in swine: transmissible gastroenteritis virus (TGEV) and transmissible gastroenteritis; porcine respiratory coronavirus (PRCV), being a mutant of TGEV, and porcine respiratory coronavirus infection; porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) and porcine epidemic diarrhea; hemagglutinating encephalomyelitis virus (HEV) and vomiting and wasting disease. In case of TGE and porcine respiratory coronavirus infection particularly the laboratory diagnostic tests were mentioned, enabling the differential diagnosis of the two mentioned diseases. In case of porcine epidemic diarrhea the clinical symptoms and pathologic lesions were presented. Laboratory diagnosis, indicating particularly RT-PCR as a valuable diagnostic test for the identification of the virus, was mentioned. This was followed by the information concerning prevention and control of the disease. As an important procedure of preventing PED introduction to the farm the effective biosecurity, referring to humans, vehicles and equipment contacting with the swine, was suggested as obligatory. Following this the HEV and the vomiting and wasting disease was shortly described. Two main clinical pictures of the infection, occurring in pigs below 3-4 weeks of age as the consequence of the neurotropism of HEV, were indicated. It also was underlined that the etiological agent is endemic in both breeding and fattening swine.
też wywoływać u prosiąt zapalenie płuc, zwłaszcza w sprzyjających okolicznościach, np. równoczesnego zakażenia drobnoustrojami o właściwościach immu-nosupresyjnych (9, 10).
Na ostrość objawów mają wpływ inne wirusowe patogeny lub bakterie warunkowo chorobotwórcze, występujące w stadzie świń. Przykładowo: zakażenie PRRSV wspólnie z PRCV powoduje długo utrzy-mującą się gorączkę z chorobą układu oddechowego i obniżonymi przyrostami masy ciała przy określonym udziale w tym procesie PRCV (10).
W kontekście diagnozy różnicowej z TGE – PRCV nie wywołuje biegunki ani skracania kosmków jelita cienkiego i prawie wyłącznie występuje w układzie oddechowym (20).
Obecnie do identyfikacji i odróżniania TGEV i PRCV powszechnie używane są odpowiednie testy RT-PCR (3, 11).
Do izolacji PRCV preferowane są komórki nerki (PK) i jąder (PT) świni. Identyfikacja wirusa w ho-dowli komórkowej może następować przy użyciu testu seroneutralizacji lub immunofluorescencji (5) oraz RT-PCR i zastosowaniu odpowiednich dla TGEV i PRCV primerów (4, 11).
Występujące w surowicy świń przeciwciała anty--TGEV i anty-PRCV są w swej swoistości antygenowej podobne, można je jednak odróżnić stosując blocking--ELISA (20). W nawiązaniu do tego, zgodnie z danymi Podręcznika OIE (Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals) z 2012 r. (14), testami identyfikującymi TGEV są testy ELISA, blokujące lub kompetencyjne (blocking lub competition ELISA’s), w których stosowane są przeciwciała monoklonalne (MAb) rozpoznające TGEV, ale nie PRCV (1, 2, 17, 28, 30).
Określenie endemicznej postaci TGE lub infekcji wywołanej przez PRCV łączy się z testowaniem suro-wic od 2-6-miesięcznych świń na obecność odnośnych przeciwciał, w tym wieku bowiem nie występują już przeciwciała siarowe, a wyłącznie związane z aktyw-nym uodpornieniem, czyli obecnością wirusa w sta-dzie. Wynik dodatni wskazuje zatem, że w danym stadzie znajdują się bezobjawowi siewcy przekazujący innym, wolnym od infekcji świniom TGEV lub PRCV.
PEDV i epidemiczna biegunka świń
Choroba ta ze względu na obecnie szczególnie duże rzeczywiste (Azja i USA) lub potencjalne (Europa) znaczenie w porównaniu do pozostałych, wywołanych przez koronawirusy chorób świń, zostanie omówiona szerzej, zwłaszcza ze względu na brak polskojęzycz-nych publikacji na ten temat.
Zjadliwość poszczególnych szczepów PEDV zale-ży od sekwencji genów kodujących białka wypustek otoczki (Spike S).
PEDV namnaża się w komórkach linii Vero w obec-ności trypsyny. Efekt cytopatyczny charakteryzuje się wakuolizacją i tworzeniem syncytiów (8).
PEDV, podobnie jak TGE, wywołuje u świń utratę apetytu, biegunkę i wymioty, przy znacznie większej zachorowalności i śmiertelności u prosiąt osesków i warchlaków krótko po odsadzeniu od lochy (16).
Jak wynika z danych przedstawionych przez Pen- saerta i Yeo (22) oraz Oldhama (18), w Anglii po raz pierwszy wykazano w 1971 r. u warchlaków i tuczni-ków jednostkę chorobową bardzo podobną klinicznie do TGE, w przypadku której wykluczono jako czynnik etiologiczny TGEV i inne enteropatogenne drobno-ustroje wywołujące biegunkę. Choroba ta przeniosła się do szeregu krajów Europy.
Zgodnie z opisem Pensaerta i Yeo (22) oraz Pejsaka (19) wynika, że w okresie od 1982 r. do 1990 r. wykry-wano u świń przeciwciała swoiste dla PEDV w Anglii, Belgii, Niemczech, Francji, Holandii, Szwajcarii, Bułgarii. Izolowano też wirus PED w większości krajów europejskich oraz w Ludowej Republice Chin, Korei i Japonii (22, 26).
W Europie od końca lat osiemdziesiątych, jak przed- stawiają Saif i wsp. (26), rozpoznania PED stały się rzadkie. Natomiast były one coraz częstsze w Azji, w tym w Japonii, Korei, Tajlandii i w Ludowej Re- publice Chin.
W nawiązaniu do powyższego, PED rozpoznawano w państwach europejskich w latach 1971-1990 dość często, a w latach następnych sporadycznie (26). W Azji, w tym na terenie Japonii, zgodnie z tą samą publikacją, potwierdzano PED w 1982 r. i coraz czę-ściej w ciągu następnych kilkunastu lat – przy śmier-telności prosiąt osesków w granicach 30-100%. PED stwierdzono w Korei w 1993 r. we wszystkich grupach wiekowych świń. Choroba ta dotyczyła ponad 50% zachorowań prosiąt osesków wywołanych w sumie wszystkimi diagnozowanymi wirusami enteropatogen-nymi w latach dziewięćdziesiątych; w 1994 r. średnio 45% świń rzeźnych było zakażonych wirusem PED. Choroba ta stanowiła również znaczącą przyczynę strat u świń w Indiach. Do dziś występuje często w Chinach, Wietnamie i Tajlandii (26).
W USA obecność PEDV w materiale od świń została stwierdzona laboratoryjnie w maju 2013 r. (http://www. aasv.org/aasv%20website/Resources/Diseases/PED/ LABSUMTOT_WK_STATE.pdf). Aktualnie w USA ogniska choroby rozpoznawane są nadal, przy dużej dynamice szerzenia się.
Dane prezentowane przez państwowe laboratoria diagnostyczne USA Sieci Laboratoriów Diagnostycz- nych Zdrowia Zwierząt (National Animal Health Laboratory Network, NAHLN) informują, że obecnie (druga połowa 2013 r.) co tydzień wykrywa się u świń 40-50 nowych przypadków chorobowych, których czynnikiem etiologicznym jest PEDV. Ponieważ PED łatwo rozpoznać klinicznie, to nie w każdym przypadku próbki przesyłane są do laboratorium diag- nostycznego. Z tego powodu podane wyżej wyniki o występowaniu PED są zaniżone w porównaniu do sytuacji epidemiologicznej panującej rzeczywiście.
Według danych Scheidegger (27) z września 2013 r., PED rozpoznano w 16 stanach USA, co oznacza, że aktualnie zasięg występowania choroby zwiększa się z dużą szybkością. Padają w wysokim odsetku zwłaszcza prosięta oseski i warchlaki tuż po odsadze-niu. Od pierwszej identyfikacji wirusa PED w USA wykazano jego obecność w ponad 400 ogniskach choroby, występujących z reguły w dużych fermach, względnie aglomeracjach przede wszystkim w stanach o dużej gęstości świń. Liczba przypadków zachorowań zwiększa się znacząco z upływem czasu, jak wynika ze sprawozdań Departamentu Rolnictwa, Inspekcji Zdrowia Zwierząt i Roślin USA. Największą liczbę zachorowań i padnięć prosiąt rejestruje się głównie w stanach Iowa, Minnesota i Kolorado.
Najczęstszym sposobem bezpośredniego lub pośred-niego przeniesienia wirusa PED z osobnika zakażonego lub przedmiotu zanieczyszczonego na świnie wolne od infekcji jest zakażenie doustne. Najważniejszym źró-dłem PEDV jest kał chorujących na PED świń. Wirus wprowadzają do ferm osobniki zakażone. Czynią to również zanieczyszczone wirusem środki transportu, człowiek, w tym obuwie, ubiór i przedmioty kontaktu-jące się ze środowiskiem, w którym przebywają świnie. Siewstwo wirusa utrzymuje się 7-9 dni (6, 26).
Zgodnie z danymi przedstawionymi przez Pospischila i wsp. (23) oraz Saif i wsp. (26), początek rozwoju procesu zakaźnego ma miejsce w cytoplazmie entero-cytów jelita cienkiego i komórek nabłonka kosmków jelitowych w okresie 12-18 godzin trwającej infekcji. Wynikiem jest degeneracja enterocytów. Zmiany chorobowe wywołane przez PEDV są podobne do zmian powodowanych przez TGEV. PEDV wykazano też w enterocytach okrężnicy. Replikacji PEDV poza komórkami nabłonka jelit nie stwierdzono.
Ustalony eksperymentalnie okres inkubacji wynosi 36 godzin. Jeżeli wprowadzone zostały siejące PEDV świnie do stada zwierząt wolnych od infekcji, to obja-wy kliniczne u dotychczas niezakażonych osobników występują w ciągu 4-5 dni. Inkubacja PEDV jest nieco dłuższa niż w przypadku TEG (19, 26).
Zgodnie z danymi przedstawionymi przez Pensaerta i wsp. (22) oraz Saif i wsp. (26), głównym objawem PED, obok utraty apetytu, jest wodnista biegunka i wymioty oraz odwodnienie. W fermach o cyklu za-mkniętym zachorowują świnie wszystkich grup wie-kowych. U prosiąt ssących zachorowalność dochodzi do 100%, natomiast u loch jest bardziej zróżnicowana w jednym stadzie i przy porównywaniu różnych stad. Prosięta w wieku do pierwszego tygodnia życia giną z powodu odwodnienia po 3-4 dniach trwania biegunki. Średnia śmiertelność prosiąt określana jest na 50%, ale może dochodzić do 100%. Prosięta starsze zdro-wieją po około 1 tygodniu od wystąpienia objawów chorobowych. Lochy po zakażeniu mogą wykazywać biegunkę lub zależnie od osobnika zakażonego, może ona nie wystąpić. Wtedy jedynymi objawami PED są: depresja i utrata apetytu. U tuczników na ogół
wszystkie zakażone zwierzęta demonstrują wystąpie-nie przemijającej biegunki, utratę apetytu i osowiałość. Zejścia śmiertelne są rzadkie.
W fermach o cyklu zamkniętym, z produkcją pro-siąt na zewnątrz, w kolejnych cyklach produkcyjnych biegunka prosiąt staje się mniej intensywna lub zanika, mimo obecności wirusa, ze względu na przekazywanie oseskom siarowej i laktogennej odporności przeciw PED ze strony naturalnie lub sztucznie uodpornionych loch.
W okresie po odsadzeniu i zaniku biernej odporności może pojawić się tzw. biegunka okresu poodsadzenio-wego (15). Często występuje też u prosiąt i warchla-ków biegunka polietiologiczna, w wywoływaniu któ-rej, obok PEDV, uczestniczą inne wirusy lub bakterie. Generalnie, objawy PED są podobne do wywoła-nych przez TGEV, chociaż przebieg choroby jest może mniej ostry (22, 26).
Zmiany patologiczne ograniczają się do jelita cien-kiego, charakteryzując się zapaleniem tego odcinka przewodu pokarmowego (12). Jego treść jest wodni-sta i barwy żółtawej. Padłe prosięta oseski, u których występowała biegunka, są silnie odwodnione. Badanie histopatologiczne wykazuje znaczącą cytoplazmatycz-ną wakuolizację i eksfoliację enterocytów. Kosmki jelitowe są zredukowane do ⅔ pierwotnej wysokości. Zmiany patologiczne są podobne do występujących w przypadku TGE, chociaż podobnie jak w przypadku objawów klinicznych są mniej wyraźnie wykształcone.
Badanie kliniczne i sekcyjne nie jest wystarczają-ce do rozpoznania PED, gdyż szereg innych chorób wirusowych lub bakteryjnych przebiega z podobnym obrazem chorobowym, w związku z tym diagnoza wymaga wykonania badań laboratoryjnych.
Do badań mających na celu identyfikację wirusa na-leży pobrać około 10 ml płynnego kału lub zawartości jelit od prosięcia z PED o ostrym przebiegu w ciągu 24 godzin licząc od początku choroby, w tym biegunki i możliwie szybko dostarczyć w schłodzeniu do la-boratorium. Do badań laboratoryjnych służą również wycinki jelita biodrowego i jelita czczego, pobrane jak najwcześniej po śmierci zwierzęcia. Również je należy jak najwcześniej w schłodzeniu dostarczyć do laboratorium. Oprócz badań w kierunku PEDV zaleca się wykonać, w ramach diagnozy różnicowej, badanie w kierunku wirusa TGE i rotawirusów oraz badania bakteriologiczne w kierunku Brachyspira spp., Clostridium spp., E. coli – patotypu ETEC i jego wirotypów chorobotwórczych dla świń, Enterococcus
durans, Lawsonia intracellularis, Salmonella spp.
(http://vetmed.-iastate.edu/vdpam/disease-topics/ porcine-epidemic-diarrhea-ped-diagnostic-testing). Testem szczególnie przydatnym do identyfikacji PEDV jest test RT-PCR (13).
Jak podają Saif i wsp. (26), bezpośrednie wykazanie PEDV i/lub jego antygenów przy zastosowaniu bezpo-średniej immunofluorescencji lub badań immunohisto-chemicznych rozcierów lub skrawków tkanek ściany
jelita cienkiego prosiąt osesków, padłych 1 dzień po pojawieniu się biegunki – stanowi, oprócz RT-PCR, podstawę do rozpoznania PED (7).
Izolacja szczepów terenowych PEDV z kału uzyski-wana jest w hodowlach komórek Vero lub innych linii komórkowych, a wykrycie w nich wirusa osiąga się przy użyciu testu immunofluorescencji (29).
Do wykrywania swoistych przeciwciał stosowany jest test ELISA z antygenami wirusa namnożonego w komórkach linii Vero (26).
Bardzo istotnym elementem zapobiegania PED jest ścisłe przestrzeganie, by do stada świń zdrowych nie zostały wprowadzone osobniki zakażone lub pocho-dzące z ferm, w których endemicznie występuje PED. Zakaz wchodzenia na teren fermy dotyczy również ludzi z zewnątrz, których ubiór, obuwie lub ręce mogą być zanieczyszczone kałem zawierającym PEDV. To samo odnosi się do zanieczyszczonych przedmiotów oraz środków transportu. Ważnym warunkiem profilak-tyki jest częsta dezynfekcja fermy i ograniczanie kon-taktu z potencjalnymi zewnętrznymi źródłami PEDV. Zalecanym środkiem dezynfekcji w przypadku PEDV jest m.in. Virkon S. w rozcieńczeniu 1 : 100 (23).
Celowe jest, po stwierdzeniu pierwszych zachoro-wań w stadzie produkującym prosięta, natychmiasto-we zakażanie wszystkich loch prośnych przy użyciu wodnistego kału lub rozcieru jelit od chorych na PED prosiąt. Zawarty w tych materiałach wirus indukuje u loch wytwarzanie swoistych dla PEDV przeciwciał przekazywanych oseskom w siarze (bierna odporność posiarowa), a następnie w mleku (odporność lakto-genna). Niektórzy zalecają uodpornienie materiałem biologicznym, zawierającym PEDV, prosiąt po od-sadzeniu od loch oraz warchlaków i tuczników, co skraca występowanie klinicznej postaci PED w danym stadzie (16, 26).
W Europie nie opracowano dotychczas szczepionki przeciw PED, natomiast w Chinach oraz innych kra-jach Azji dostępna jest biwalentna szczepionka z ate-nuowanym szczepem TGE i szczepem CV777 PED oraz szereg innych podobnych szczepionek z innymi szczepami PEDV, atenuowanymi lub inaktywowanymi (16).
Mimo istnienia szeregu szczepionek przeciw PED w Azji, ze względu na antygenowe zróżnicowanie szczepów wywołujących PED, zdaniem McOrista (16) uzyskanie skutecznych biopreparatów wymaga dalszych badań, ponieważ obecnie dostępne szcze-pionki nie spełniają oczekiwań. Natomiast stosowanie materiału wirusowego z jelit padłych na PED prosiąt do równoczesnego zakażenia wszystkich świń w fermie daje wyniki pozytywne, przy, niestety, krótkim okresie odporności (16).
Reasumując, PED nie jest chorobą o obowiązku zgłaszania do Światowej Organizacji Zdrowia Zwierząt (OIE), przeciwnie niż TGE. Wirus wywołujący PED
nie jest chorobotwórczy dla ludzi ani innych gatunków zwierząt, poza świnią. Mimo to stanowi przyczynę poważnych strat, nie wykluczając istniejącego ryzyka odnośnie do terenu Polski wobec aktywizujących się aktualnie epidemii w Azji i ostatnio w USA.
HEV i choroba wymiotna i wyniszczająca świń (vomiting and wasting disease, VWD)
Czynnikiem etiologicznym wymienionej choroby jest koronawirus o nazwie hemaglutynujący wirus zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego (hemagglutina-ting encephalomyelitis virus, HEV). Jak wspomniano, należy on do rodzaju Betacoronavirus. W tych ramach występuje tylko jeden serotyp szczepów chorobo-twórczych dla świń, mimo że obraz chorobowy jest zróżnicowany (19, 26).
Na podstawie badań serologicznych wykazano w latach 1960-1990, że infekcja ma miejsce na całym świecie i że HEV występuje u świń hodowlanych oraz u tuczników (21). Został on zidentyfikowany na podstawie badań serologicznych surowic świń lub izolacji wirusa w Belgii, Anglii, Niemczech, Północnej Irlandii, Francji, Austrii, Danii oraz Kanadzie, USA, Argentynie, Japonii na Tajwanie i w Australii.
Okres inkubacji wynosi 4-7 dni. U prosiąt poniżej 3-4 tygodni (a w zasadzie nie u starszych) jako skutek neurotropizmu wirusa rozwija się: 1) typowa postać choroby (VWD) charakteryzująca się częstymi wymio-tami, które prowadzą do wyniszczenia albo 2) choroba o ostrym zapaleniem mózgu i rdzenia z zaburzeniami motorycznymi (19, 26). Prosięta padają w ciągu 5 dni, licząc od pierwszych objawów chorobowych. U tych, które przeżyją ten okres, z reguły dochodzi do wyle-czenia. Nie stwierdza się, jak wspomniano, objawów chorobowych u prosiąt powyżej 4 tygodni i u tuczni-ków, ale HEV występuje endemicznie u bezobjawowo zakażonych świń hodowlanych i u tuczników, przecho-dząc na kolejne grupy produkcyjne fermy (26).
Wymioty i porażenia jelit wywołane są zaburzeniami czynności wegetatywnego systemu nerwowego, czego efektem jest dysfunkcja w zakresie perystaltyki żołąd-ka i jelit oraz być może też innych narządów w obrę-bie jamy brzusznej. Lochy o infekcji bezobjawowej wytwarzają przeciwciała swoiste, przekazywane po porodzie prosiętom oseskom, co przeciwdziała roz-wojowi procesu chorobowego (26).
Zwalczanie uwzględnia doustne podawanie wysoko ciężarnym lochom kału lub rozciera z jelit padłych prosiąt z powodu HEV. Uzasadnione jest 2-3-krotne stosowanie tego zabiegu w dawce 30-50 g materiału zawierającego wirus, w celu zwiększenia prawdopo-dobieństwa zakażenia i immunizacji przeciw VWD.
Rozpoznanie opiera się na izolacji wirusa i jego identyfikacji oraz użyciu RT-PCR (25).
Świnia jest jedynym gatunkiem wrażliwym na zaka-żenie HEV. Nie ma obowiązku zgłaszania wystąpienia VWD w danym kraju do OIE.
Piśmiennictwo
1. Brown I. H., Paton D. J.: Serological studies of transmissible gastroenteritis in Great Britain, using a competitive ELISA. Vet. Rec. 1991, 128, 500-503. 2. Callebaut P., Pensaert M. B., Hooyberghs J.: A competitive inhibition ELISA
for the differentiation of serum antibodies from pigs infected with transmissible gastroenteritis virus (TGEV) or with the TGEV-related porcine respiratory coronavirus. Vet. Microbiol. 1989, 20, 9-19.
3. Costantini V., Lewis P., Salop J., Templeton C., Saif L. J.: Respiratory and enteric shedding of porcine respiratory coronavirus (PRCV) in sentinel weaned pigs and sequence of the partial S-gene of the PRCV isolates. Arch. Virol. 2004, 149, 957-974.
4. Enjuanes L., Van der Zeijst B.: Molecular basis of transmissible gastroenteritis virus epidemiology, [w:] Siddell S. G. (ed.): The Coronavidae. New York, Plenum Press 1995, 337-376.
5. Garwes D. J., Stewart F., Cartwright S. F., Brown I.: Differentiation of porcine coronavirus from transmissible gastroenteritis virus. Vet. Rec. 1988, 122, 86-87.
6. Geiger J. O., Connor J. F.: Porcine epidemic diarrhea, diagnosis, and elimi-nation. www.cvm.umn.edu/.../cvm_content_446533.pdf, 2013, 1-4. 7. Guscetti F., Bernasconi C., Tobler K., Van Reeth K., Pospischil A., Acker-
mann M.: Immunohistochemical detection of porcine epidemic diarrhea virus
compared to other methods. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998, 5, 412-414. 8. Hofmann M., Wyler R.: Propagation of the virus of porcine epidemic diarrhea
in cell culture. J. Clin. Microbiol. 1988, 26, 2235-2239.
9. Jung K., Alekseev K. P., Zhang X., Cheon D. S., Vlasova A. N., Saif L. J.: Altered pathogenesis of porcine respiratory coronavirus in pigs due to im-munosuppressive effects of dexamethasone: Implications for corticosteroid use in treatment of severe acute respiratory syndrome coronavirus. J. Virol. 2007, 81, 13681-13693.
10. Jung K. J., Renukaradhya G. J., Alekseev K. P., Fang Y., Tang Y., Saif L. J.: Porcine reproductive and respiratory syndrome virus modifies innate immu-nity and alters disease outcome in pigs subsequently infected with porcine respiratory coronavirus: implications for respiratory viral co-infections. J. Gen. Virol. 2009, 90, 2713-2723.
11. Kim L., Chang K. O., Sestak K., Parwani A., Saif L. J.: Development of a re-verse transcription-nested polymerase chain reaction assay for differential diagnosis of transmissible gastroenteritis virus and porcine respiratory coro-navirus from feces and nasal swabs of infected pigs. J. Vet. Diagn. Investig. 2000, 12, 385-388.
12. Kim O., Chae C.: Experimental infection of piglets with a korean strain of porcine epidemic diarrhoea virus. J. Comp. Pathol. 2003, 129, 55-60. 13. Kubota S., Sasaki O., Amimoto K., Okada N., Kitazima T., Yasuhara H.:
Detection of porcine epidemic diarrhea virus using polymerase chain reaction and comparison of the nucleocapsid protein genes among strains of the virus. J. Vet. Med. Sci. 1999, 61, 827-830.
14. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (mammals, birds and bees). World Organisation for Animal Health OIE, Paris, France 2012, 7th ed., vol. 2.
15. Martelli P., Lavazza A., Nigrelli A. D., Merialdi G., Alborali L. G., Pensaert
M. B.: Epidemic of diarrhoea caused by porcine epidemic diarrhoea virus in
Italy. Vet. Rec. 2008, 162, 307-310.
16. McOrist S.: PED (Porcine Epidemic Diarrhoea) on the rampage. (http://www. pig333.comp/print/7293), 2013, 1-4.
17. Nieuwstadt A. P. Van, Boonstra J.: A competitive ELISA to distinguish TGEV- from PRCV-infected pigs. Int. Pig Vet. Soc. Proc. 1991, 265.
18. Oldham J.: Letter to the editor. Pig Farming (Suppl. Oct.), 1972, 72-73. 19. Pejsak Z.: Ochrona zdrowia świń. Polskie Wydawnictwo Rolnicze, Poznań
2007.
20. Pensaert M. B.: Transmissible gastroenteritis virus (respiratory variant). In Virus Infections of Vertebrates, [w:] Pensaert M. B. (ed.): Virus Infections of Porcines. Amsterdam, The Netherlands. Elsevier Science Publishers BV 1989, 2, s. 154-165.
21. Pensaert M. B.: Hemagglutinating encephalomyelitis virus, [w:] Straw B. E., Zimmerman J. J., D’Allaire S., Taylor D. J.: Diseases of Swine. Blackwell Publishing, Ames, Iowa, USA 2006, 9th ed., 353-358.
22. Pensaert M. B., Yeo S. G.: Porcine Epidemic Diarrhea, [w:] Straw B. E., Zimmerman J. J., D’Allaire S., Taylor D. J.: Diseases of Swine. Blackwell Publishing, Ames, Iowa, USA 2006, 9th ed., 367-372.
23. Pospischil A., Stuedli A., Kiupel M.: Update on porcine epidemic diarrhea. J. Swine Health Prod. 2002, 10, 81-85.
24. Quinn P. J., Markey B. K., Leonard F. C., FitzPatrick E. S., Fanning S.,
Hartigan P. J.: Veterinary Microbiology and Microbial Disease.
Wiley-Blackwell, 2011, 2nd Edition, 700-712.
25. Quiroga M. A., Cappuccio J., Piñeyro P., Basso W., Moré G., Kienast M.,
Schonfeld S., Cáncer J. L., Arauz S., Pintos M. E., Nanni M., Machuca M., Hirano N., Perfumo C. J.: Hemagglutinating encephalomyelitis coronavirus
infection in pigs, Argentina. Emerg. Infect. Dis. 2008, 14, 484-486. 26. Saif L. J., Pensaert M. B., Sestak K., Yeo S. G., Jung K.: Coronaviruses, [w:]
Zimmerman J. J., Karriker L. A., Ramirez A., Schwartz K. J., Stevenson G. W.: Diseases of Swine. Wiley-Blackwell, Ames, Iowa, USA, 2012, 10th ed., 501-524.
27. Scheidegger J.: Porcine epidemic diarrhea virus continues to spread across U.S. http://license.icopyright.net/rights/tag.act?tag=3.7449%3ficx_id=817889, 2013.
28. Sestak K., Zhou Z., Shoup D. O., Saif L. J.: Evaluation of the baculovirus--expressed S glycoprotein of transmissible gastroenteritis virus (TGEV) as antigen in a competition ELISA to differentiate porcine respiratory coronavirus from TGEV antibodies in pigs. J. Vet. Diagn. Invest. 1999, 11, 205-214. 29. Shibata I., Tsuda T., Mori M., Ono M., Sueyoshi M., Uruno K.: Isolation of
porcine epidemic diarrhea virus in porcine cell cultures and experimental infection of pigs of different ages. Vet. Microbiol. 2000, 72, 173-182. 30. Simkins R. A., Weilnau P. A., Bias J., Saif L. J.: Antigenic variation among
transmissible gastroenteritis virus (TGEV) and porcine respiratory coronavirus strains detected with monoclonal antibodies to the S protein of TGEV. Am. J. Vet. Res. 1992, 53, 1253-1258.
31. Wesley R. D., Woods R. D.: Induction of protective immunity against transmis-sible gastroenteritis virus after exposure of neonatal pigs to porcine respiratory coronavirus. Am. J. Vet. Res. 1996, 57, 157-162.
Adres autora: prof. zw. dr hab. Marian Truszczyński, Państwowy Instytut Weterynaryjny – Państwowy Instytut Badawczy, Al. Partyzantów 57, 24-100 Puławy; e-mail: mtruszcz@piwet.pulawy.pl
