Medycyna Wet. 2011, 67 (5) 318
Praca oryginalna Original paper
Antybiotyki, których zasadnicz¹ funkcj¹ jest hamo-wanie rozwoju lub zabijanie okrelonych bakterii, w zwi¹zku z wprowadzeniem zakazu stosowania an-tybiotykowych stymulatorów wzrostu na terenie ca³ej Unii Europejskiej z dniem 1 stycznia 2006 r. maj¹ za-stosowanie w medycynie weterynaryjnej ju¿ tylko jako rodki lecznicze (1, 4, 7, 9, 12).
Pozosta³oci antybiotyków w produktach spo¿yw-czych pochodzenia zwierzêcego obni¿aj¹ ich techno-logiczn¹ wartoæ, prowadz¹c do strat ekonomicznych (10, 19). Stanowi¹ tak¿e zagro¿enie dla zdrowia kon-sumentów. Pozosta³oci antybiotyków, hormonów czy sterydów wystêpuj¹ce w ¿ywnoci mog¹ powodowaæ u ludzi alergie pokarmowe, zaburzenia czynnoci
nie-których gruczo³ów, w tym w¹troby, niewydolnoæ ne-rek, anemiê, agranulocytozê, trombocytopeniê oraz zanieczyszczaæ rodowisko (5, 12). Ich szerokie za-stosowanie mo¿e tak¿e prowadziæ do powstawania szczepów lekoopornych.
Produktem najbardziej nara¿onym na pozosta³oci antybiotyków jest mleko. Zwi¹zane jest to z powszech-nym stosowaniem tych leków w terapii i profilaktyce mastitis. Dodatkowym zagro¿eniem mog¹ byæ pozo-sta³oci w mleku rodków myj¹cych oraz myj¹co-de-zynfekcyjnych stosowanych w procesie sanitacji urz¹-dzeñ mleczarskich (6, 18).
W latach 60. XX wieku w naszym kraju pojawi³y siê pierwsze regulacje prawne dotycz¹ce pozosta³oci
Pozosta³oci antybiotyków w ¿ywnoci
pochodzenia zwierzêcego na terenie województwa
warmiñsko-mazurskiego w latach 2005-2009
JOANNA PIOTROWSKA, TOMASZ MITUNIEWICZ, JANINA SOWIÑSKA, BARBARA GONKIEWICZ*, JERZY SOBCZAK*, RAFA£ WO£OSIUK
Katedra Higieny Zwierz¹t i rodowiska Wydzia³u Bioin¿ynierii Zwierz¹t UWM, ul. Oczapowskiego 5, 10-718 Olsztyn *Zak³ad Higieny Weterynaryjnej, al. Warszawska 109, 10-957 Olsztyn
Piotrowska J., Mituniewicz T., Sowiñska J., Gonkiewicz B., Sobczak J., Wo³osiuk R.
Antibiotic residues in animal-derived food in the Warmia and Mazury region in the years 2005-2009 Summary
The presence of various residues affects the quality and the health safety of animal-derived food. Currently, customers increasingly pay attention to the food health quality, which is becoming the decisive factor in their choices.
The aim of this study was to analyse the residues of antibiotics and other antibacterial substances in the tissues of fish and slaughter animals, as well as in milk and dairy products, produced for consumption. The analysis of antibiotic and antibacterial residues in animal-derived food was conducted according to the research results of the Institute of Veterinary Hygiene in Olsztyn. The research material consisted of milk and whey samples, as well as muscles and internal organs (liver, kidney) of pigs, cattle, poultry, game, and fish. The samples were collected in the Warmia and Mazury region in the years 2005-2009. Antibiotics and other antibacterial substances in milk and dairy products were detected with diffusive microbiological tests (Delvotest SP-NT). For the detection of antibiotic and other antibacterial residues in the tissues of slaughter animals and fish, the 4-platelet method was used. The analysis of the results showed that the percentage of positive samples in the material collected in 2005-2009 was relatively small. Out of 1851 samples of animal muscles and internal organs tested, four (0.22%) gave positive results. As for milk and whey, nine (1.11%) out of 811 samples appeared to contain antibiotics or inhibitory substances. The number of positive samples was greater for milk and dairy products than for slaughter animal and fish tissues.
Nevertheless, even the smallest number of positive samples does not mean that monitoring may be neglected. Farm producers should be constantly reminded to use antibiotic substances properly and to observe waiting periods.
Medycyna Wet. 2011, 67 (5) 319 antybiotyków w ¿ywnoci. Wraz z rozwojem nauki
oraz nowymi dowiadczeniami przepisy te s¹ syste-matycznie aktualizowane. Pañstwa cz³onkowskie Unii Europejskiej obowi¹zuj¹ dodatkowo regulacje zawar-te w Dyrektywie Rady 96/23 z dnia 29 kwietnia 1996 r. (3), która zosta³a uzupe³niona Decyzj¹ Komisji z dnia 21 padziernika 1996 r. (97/747/EC) (2). Do przestrze-gania tych przepisów, oprócz krajów cz³onkowskich oraz stowarzyszonych, zobligowane s¹ wszystkie kra-je eksportuj¹ce produkty lub surowce pochodzenia zwierzêcego na teren Unii (8, 13). Pañstwa te, w tym równie¿ Polska, zobowi¹zane s¹ do posiadania i rea-lizowania programów badañ monitoringowych (13). W Polsce regulacje dotycz¹ce antybiotyków zawarte s¹ w ustawie z dnia 16 grudnia 2005 r. o produktach pochodzenia zwierzêcego (Dz. U. z 2006 r. nr 17, poz. 127 z póniejszymi zmianami) (15) oraz w usta-wie z 25 sierpnia 2006 r. o bezpieczeñstusta-wie ¿ywnoci i ¿ywienia (Dz. U. z 2006 r. nr 171, poz. 1225) (16).
Celem niniejszego opracowania by³a analiza pozo-sta³oci antybiotyków i innych substancji przeciwbak-teryjnych w ¿ywnoci pochodzenia zwierzêcego. Ba-dania obejmowa³y teren województwa warmiñsko--mazurskiego w latach 2005-2009.
Materia³ i metody
Analizy pozosta³oci antybiotyków oraz in-nych substancji przeciwbakteryjin-nych w ¿yw-noci pochodzenia zwierzêcego dokonano w oparciu o wyniki badañ Zak³adu Higieny Weterynaryjnej w Olsztynie. Próbki do badañ pobierane w latach 2005-2009 pochodzi³y z terenu województwa warmiñsko-mazurskie-go. Organem odpowiedzialnym za pobieranie próbek jest Powiatowa Inspekcja Weteryna-ryjna, postêpuj¹ca zgodnie z wytycznymi za-wartymi w ustawie z dnia 29 stycznia 2004 r. o Inspekcji Weterynaryjnej (Dz. U. nr 33, poz. 287 z póniejszymi zmianami) (17). Materia³ do badañ stanowi³y próbki mleka, serwatki, jaj oraz miêni i narz¹dów wewnêtrznych (w¹troba, nerki) pochodz¹ce od byd³a, wiñ, drobiu, dziczyzny i ryb. £¹cznie badaniom poddano 1851 próbek miêni, narz¹dów we-wnêtrznych zwierz¹t i jaj oraz 811 próbek mleka i serwatki.
Pozosta³oci antybiotyków i innych sub-stancji przeciwbakteryjnych w tkankach zwie-rz¹t rzenych, ryb oraz w jajach okrelono przy pomocy metody czterop³ytkowej (14). Jest to mikrobiologiczna metoda dyfuzyjna z zastosowaniem dwóch szczepów testowych: Bacillus subtilis BGA i Micrococcus luteus ATCC 9341 oraz po¿ywek o zró¿nicowanym pH: 8,0; 7,2 i 6,0. Ró¿norodnoæ szczepów testowych oraz pH pod³o¿a pozwala rozpo-znaæ substancje antybakteryjne. Dodanie do po¿ywki o pH 7,2 trimetoprimu (TMP) pod-nosi czu³oæ metody w przypadku wykrywa-nia pozosta³oci sulfonamidów.
W celu wykrycia antybiotyków i innych substancji prze-ciwbakteryjnych w mleku i jego przetworach zastosowano dyfuzyjny test mikrobiologiczny Delvo Test SP NT (11). Test ten jest metod¹ ampu³kow¹ z zastosowaniem szczepu testowego Bacillus stearothermophilus var. calidolactis C 953. Jest to szybko rosn¹ca bakteria, bardzo czu³a na peni-cylinê oraz wiêkszoæ antybiotyków i innych substancji an-tybakteryjnych. Szczep ten ma równie¿ podwy¿szon¹ wra¿-liwoæ na sulfonamidy. Zalet¹ tego testu jest mo¿wra¿-liwoæ d³ugotrwa³ego przechowywania w obni¿onej temperaturze bez utraty przez przetrwalniki zdolnoci wzrostu.
Wyniki i omówienie
Wyniki badañ pozosta³oci antybiotyków w tkan-kach zwierz¹t rzenych, ryb, dziczyzny oraz jajach podano w tab. 1. Na przebadanych w analizowanym okresie 1851 próbek w 4 wykryto pozosta³oci anty-biotyków, które stanowi³y 0,22% wszystkich próbek.
Wród zwierz¹t rzenych próbek dodatnich nie stwierdzono u drobiu. Dla porównania, w badaniach przeprowadzonych w województwie warmiñsko-ma-zurskim przez ZHW w Olsztynie we wczeniejszym okresie (lata 1996-2002) u drobiu wykryto 2 próbki pozytywne na 3510 przebadanych (0,05%) (8).
Wy¿-j a z d o R i k b ó r p pLrióczbbeak k o R m e z a R 5 0 0 2 2006 2007 2008 2009 a t ê z c r u K badanych 42 44 37 35 24 182 h c i n t a d o d y r u K badanych 4 3 1 8 h c i n t a d o d i k y d n I badanych 43 46 45 50 50 234 h c i n t a d o d i s ê G badanych 6 8 8 9 7 38 h c i n t a d o d e i n i w badanych 193 199 194 192 183 961 h c i n t a d o d 1(N)* 1(M,N)* 2 o ³ d y B h c y n a d a b 75 74 77 50 44 320 h c i n t a d o d 12M(1,NN);* 2 y b y R badanych 8 7 7 5 5 32 h c i n t a d o d a n z y z c iz D badanych 2 2 h c i n t a d o d a j a J badanych 10 10 11 12 13 56 h c i n t a d o d m e z a R badanych 379 398 384 360 330 1851 h c i n t a d o d 2 1 1 4
Tab. 1. Wystêpowanie pozosta³oci antybiotyków i innych substancji prze-ciwbakteryjnych w tkankach zwierz¹t rzenych, ryb, dziczyzny oraz jajach na terenie województwa warmiñsko-mazurskiego w latach 2005-2009
Medycyna Wet. 2011, 67 (5) 320
szy odsetek próbek dodatnich uzyska³a Andrzejewska (1) w badaniach przeprowadzonych w latach 2001--2006 na obszarze dwóch województw (kujawsko-po-morskiego oraz warmiñsko-mazurskiego) 3 próbki dodatnie na 903 przebadanych (0,33%). Natomiast wy-niki Krajowego Programu Badañ Kontrolnych ¯yw-noci Pochodzenia Zwierzêcego w latach 2005-2008 (wetgiw.gow.pl) wykaza³y, ¿e w skali ca³ego kraju drób by³ drugim, co do czêstoci wystêpowania pozosta³o-ci antybiotyków gatunkiem po bydle 29 wyników dodatnich z 4259 próbek (0,68%).
Najwiêksza liczba przebadanych próbek 961 po-chodzi³a z tkanek wiñ (tab. 1), wród których w dwóch przypadkach otrzymano wynik pozytywny (0,21%). W badaniach przeprowadzonych w ZHW w Olszty-nie w okresie wczeOlszty-niejszym (1996-2002) na 4834 pró-bek pochodz¹cych od tego samego gatunku zwierz¹t tylko w 1 stwierdzono wynik dodatni (0,02%) (8). Badania Andrzejewskiej (1) przeprowadzone na tere-nie województw: warmiñsko-mazurskiego i kujawsko--pomorskiego w latach 2001-2006 wykaza³y pozosta-³oci antybiotyków i innych substancji przeciwbakte-ryjnych w 5 z 2777 przebadanych próbek pochodz¹-cych od wiñ (0,18%). Odnosz¹c z kolei uzyskane wyniki w³asne do badañ kontrolnych w ca³ym kraju (2005-2008) (wetgiw.gow.pl), w których na 13 180 analizowanych próbek pochodz¹cych z tkanek wiñ w 34 odnotowano wynik pozytywny (0,26%), stwier-dziæ mo¿na, i¿ w analizowanym okresie dane dla wo-jewództwa warmiñsko-mazurskiego by³y zbli¿one do wyników krajowych.
W przypadku byd³a badaniami objêto 320 próbek (tab. 1). W pobranym materiale stwierdzono dwie prób-ki z wyniprób-kiem dodatnim (0,62%). Nale¿y zauwa¿yæ, ¿e w badaniach przeprowadzonych przez Zak³ad Higieny Weterynaryjnej w Olsztynie we wczeniej-szych latach (1996-2002) nie stwierdzono dodatku antybiotyków w materiale pobranym od
tego gatunku zwierz¹t (8). W latach 2001--2006 odsetek próbek dodatnich wzrós³ do 0,24% (2 z 814 próbek) (1), ale tak¿e by³ ni¿szy ni¿ w badaniach w³asnych. Nato-miast wyniki Krajowego Programu Badañ Kontrolnych ¯ywnoci Pochodzenia Zwierzêcego (2005-2008) (wetgiw.gov.pl), wykaza³y w³anie w próbkach pochodz¹-cych z tkanek bydlêpochodz¹-cych najwiêkszy udzia³ pozosta³oci antybiotyków 0,78% (32 próbki z 4117 przebadanych). Mo¿na wiêc stwierdziæ, ¿e w województwie warmiñ-sko-mazurskim udzia³ próbek dodatnich by³ nieco ni¿szy w porównaniu do danych odnosz¹cych siê do ca³ego kraju.
Badania ryb nie wykaza³y pozosta³oci antybiotyków w 32 próbkach pobranych w województwie warmiñsko-mazurskim w latach 2005-2009 (tab. 1), jak równie¿ w latach poprzedzaj¹cych (1996-2002)
(8). Natomiast w badaniach kontrolnych próbek ryb na terenie ca³ego kraju (2005-2008) w 349 przeba-danych próbkach wykryto 2 przypadki pozosta³oci antybiotyków i innych substancji hamuj¹cych (wet-giw.gov.pl).
W próbkach dziczyzny, zarówno w badaniach w³as-nych (tab. 1), jak i poprzedzaj¹cych analizowany okres (8), a tak¿e w ramach Krajowego Programu Badañ Kontrolnych ¯ywnoci Pochodzenia Zwierzêcego (wetgiw.gov.pl) nie wykryto pozosta³oci antybioty-ków. Mo¿na przypuszczaæ, ¿e by³o to zwi¹zane z nie-wielk¹ liczb¹ przeprowadzonych badañ tkanek po-chodz¹cych od tej grupy zwierz¹t (badania w³asne 2 próbki, badania krajowe 15 próbek).
W województwie warmiñsko-mazurskim w latach 2005-2009 nie stwierdzono pozosta³oci antybiotyków tak¿e w przebadanych 56 próbkach jaj (tab. 1). Nato-miast badania w ramach Krajowego Programu Badañ Kontrolnych ¯ywnoci Pochodzenia Zwierzêcego wykaza³y 3 próbki pozytywne na 776 przebadanych (wetgiw.gov.pl).
W tab. 2 podano wyniki badañ pozosta³oci anty-biotyków i innych substancji hamuj¹cych w mleku i jego przetworach. Na 811 przebadanych przez ZHW w Olsztynie próbek 9 (1,11%) mia³o wynik pozytyw-ny. W 2005 r. nie stwierdzono ¿adnej próbki z wyni-kiem dodatnim. Kolejne lata (2006-2009) charaktery-zowa³y siê obecnoci¹ próbek z pozosta³oci¹ anty-biotyków i innych substancji hamuj¹cych. Najwiêcej dodatnich próbek stwierdzono w 2008 r., w którym ze 115 zbadanych 5 (4,35%) da³o wynik pozytywny. Dla porównania, w 2006 r. odsetek ten stanowi³ 1,89%, w 2007 0,93%, a w roku 2009 0,27%. Ponadto warto zwróciæ uwagê na ma³¹ liczbê badañ mleka owiec oraz mleka odt³uszczonego w analizowanym okresie przebadano tylko po 1 próbce tych surowców, a obydwa wyniki by³y negatywne. Natomiast w
ser-j a z d o R a c w o r u s pLrióczbbeak k o R m e z a R 5 0 0 2 2006 2007 2008 2009 e w o r u s o k e l M badanych 108 104 103 114 368 797 h c i n t a d o d 1 1 5 1 8 o k e l M e n o z c z s u ³t d o h c y n a d a b 1 1 h c i n t a d o d a k t a w r e S badanych 5 2 4 1 12 h c i n t a d o d 1 1 e z c w o o k e l M badanych 1 1 h c i n t a d o d m e z a R badanych 114 106 107 115 369 811 h c i n t a d o d 2 1 5 1 9 k e b ó r p ³ a iz d u y w o t n e c o r P ) % ( h c i n t a d o d 1,89 0,93 4,35 0,27 1,11
Tab. 2. Wystêpowanie pozosta³oci antybiotyków oraz innych substancji hamuj¹cych w mleku i jego przetworach na terenie województwa warmiñ-sko-mazurskiego w latach 2005-2009
Medycyna Wet. 2011, 67 (5) 321 watce na 12 zbadanych próbek 1 da³a wynik
pozytyw-ny. Uzyskane wyniki badañ w³asnych wykaza³y wy¿-szy odsetek próbek dodatnich w porównaniu do ogól-nokrajowych badañ kontrolnych mleka, w których wykazano 0,42% próbek pozytywnych (27 próbek z 6446 przebadanych).
Produktem, który charakteryzowa³ siê najwiêkszym udzia³em wyników dodatnich, by³o mleko surowe. Na 797 przebadanych w latach 2005-2009 próbek 8 da³o wynik pozytywny (0,91%), z czego a¿ 5 odnotowano w 2008 r. Nale¿y zauwa¿yæ, ¿e jest to wy¿szy udzia³ próbek z pozosta³ociami antybiotyków i innych sub-stancji hamuj¹cych w porównaniu do wyników badañ przeprowadzonych w ZHW w Olsztynie w latach wczeniejszych (1996-2002), w których stwierdzono 0,60% próbek dodatnich (58 z 9682 przebadanych pró-bek mleka surowego).
Podsumowuj¹c wyniki badañ tkanek zwierzêcych oraz jaj w województwie warmiñsko-mazurskim w la-tach 2005-2009 nale¿y zauwa¿yæ, ¿e by³y one korzyst-niejsze ni¿ uzyskane w ca³ym kraju w porównywal-nym okresie. W badaniach w³asnych nie stwierdzono próbek drobiu, ryb oraz jaj z pozosta³ociami antybio-tyków, a udzia³ pozytywnych próbek tkanek byd³a i wiñ by³ nieco ni¿szy ni¿ w badaniach krajowych. Z kolei badania mleka i jego przetworów wykaza³y wy¿szy udzia³ próbek pozytywnych w porównaniu do tkanek zwierzêcych i jaj. Spowodowane to by³o praw-dopodobnie nieprzestrzeganiem przez producentów okresów karencji po kuracji antybiotykami w przypad-ku wystêpowania zapaleñ wymion oraz nieumiejêtnym stosowaniem rodków myj¹co-dezynfekcyjnych w sa-nitacji urz¹dzeñ do doju. Ponadto nale¿y podkreliæ, ¿e w województwie warmiñsko-mazurskim stwierdzo-no wiêkszy odsetek dodatnich próbek mleka w porów-naniu do wyników badañ krajowych.
Przedstawione wyniki wskazuj¹, ¿e problem pozo-sta³oci antybiotyków oraz innych substancji przeciw-bakteryjnych w ¿ywnoci pochodzenia zwierzêcego jest ci¹gle aktualny, potwierdzaj¹c zasadnoæ prowa-dzenia badañ monitoringowych. Nale¿y tak¿e podkre-liæ wa¿noæ dzia³alnoci edukacyjno-informacyjnej, maj¹cej na celu uwiadomienie polskim producentom wspó³odpowiedzialnoci za jakoæ oraz bezpieczeñ-stwo wytwarzanych surowców i produktów pochodze-nia zwierzêcego, ze szczególnym uwzglêdnieniem pro-ducentów mleka i jego przetworów.
Pimiennictwo
1.Andrzejewska O.: Pozosta³oci antybiotyków w rodkach ¿ywienia oraz tkan-kach ryb i zwierz¹t hodowlanych. Praca magisterska, Wydz. Ochrony rodo-wiska i Rybactwa UWM, Olsztyn 2006.
2.Anon.: Commission Decision of 27 October 1997 fixing the levels and fre-quencies of sampling provided for by Council Directive 96/23/EC for the monitoring of certain substances and residues thereof in certain animal pro-ducts.
3.Anon.: Council Directive 96 23 EC of 29 April 1996 on measures to monito-ring certain substances and residues thereof in live animals and animal pro-ducts.
4.Gaskins H. R., Collier C. C., Anderson D. B.: Antibiotics as growth promo-ters: mode of action. Anim. Biotechnol. 2002, 13, 29-42.
5.Kucharska U.: Analiza pozosta³oci rodków farmakologicznych w ¿ywno-ci pochodzenia zwierzêcego. Przemys³ Spo¿. 1999, 53, 43-46.
6.Lassa H., Szejniuk B., K³ossowska A.: Wp³yw liczby komórek somatycznych i stê¿enia rodka dezynfekcyjnego na obecnoæ substancji hamuj¹cych w mle-ku. Medycyna Wet. 2001, 57, 753-756.
7.Markiewicz Z., Kwiatkowski Z.: Bakterie antybiotyki lekoopornoæ. PWN, Warszawa 2008.
8.Malanka T., Jaroszewski J., Gonkiewicz B., Sobczak J.: Pozosta³oci substancji hamuj¹cych w mleku i antybiotyków w tkankach zwierzêcych. Medycyna Wet. 2004, 60, 320-322.
9.Pejsak Z., Truszczyñski M.: Racjonalne stosowanie chemioterapeutyków w terapii i profilaktyce. ¯ycie wet. 2005, 80, 642-645.
10.Pikul J., Cais-Sokoliñska D., Kroll J., Chudy S.: Wystêpowanie substancji hamuj¹cych oraz jakoæ mikrobiologiczna i cytologiczna mleka surowego. Medycyna Wet. 2001, 57, 803-806.
11.Polska Norma PN-97 A-86033. Mleko. Wykrywanie antybiotyków i innych substancji hamuj¹cych.
12.Przenios³o-Siwczyñska M., Kwiatek K.: Wybrane aspekty stosowania anty-biotyków w ¿ywieniu zwierz¹t oraz metody ich wykrywania w rodkach ¿ywienia zwierz¹t. ¯ycie wet. 2005, 80, 717-719.
13.Ró¿añska H.: Pozosta³oci antybiotyków w produktach zwierzêcych. Hodowca Drob. 2000, 1, 10-11.
14.Ró¿añska H., Wojtoñ B.: Mikrobiologiczna, dyfuzyjna metoda wykrywania pozosta³oci substancji hamuj¹cych w wie¿ym miêsie 4-p³ytkowa. PIWET, Pu³awy 1992, 2-9.
15.Ustawa z dnia 16 grudnia 2005 r. o produktach pochodzenia zwierzêcego. Dz. U. z 2006 r. nr 17 poz. 127.
16.Ustawa z dnia 25 sierpnia 2006 r. o bezpieczeñstwie ¿ywnoci i ¿ywienia. Dz. U. 2006 r. nr 171 poz. 1225.
17.Ustawa z dnia 29 stycznia 2004 r. o Inspekcji Weterynaryjnej. Dz. U. 2004 r. nr 33 poz. 287.
18.Wieczorek J., Smoczyñski S.: Badania nad wystêpowaniem substancji hamu-j¹cych w mleku. Przegl. Mlecz. 1990, 1, 24-25.
19.Zmarlicki S.: Wystêpowanie w mleku pozosta³oci antybiotyków i innych substancji hamuj¹cych. ¯ycie wet. 2001, 76, 483-488.
Adres autora: mgr in¿. Joanna Helena Piotrowska, ul. S³oneczna 17, 10-709 Olsztyn; e-mail: www.anna.piotrowska@uwm.edu.pl