Diagnostyka zakażeń SARS-CoV-2 według najnowszych doniesień

(1)

FORUM ZAKAŻEŃ 2020;111:4950

DIAGNOSTYKA ZAKAŻEŃ SARSCoV2 WEDŁUG NAJNOWSZYCH

DONIESIEŃ

ARTYKUŁ SPONSOROWANY

METODY MOLEKULARNE

Zarówno WHO (ang. World Health Organization), jak i CDC (ang. Centers for Disease Control and Prevention) zalecają test PCR (ang. polymerase chain reaction) do po-twierdzenia infekcji SARS-CoV-2. Na świecie opracowano kilka protokołów testów genetycznych, opartych na techno-logii real-time PCR (RT-PCR), wykrywających od jednego do trzech genów SARS-CoV-2 w pobranym materiale z wy-mazu z gardła.

Rekomendowane przez WHO protokoły zostały opra-cowane przez: CDC (Chiny, Stany Zjednoczone), Charité (Berlin), HKU (Hong Kong), National Institute of Infectious Diseases (Japonia), National Institute of Health (Tajlandia), Institut Pasteur (Francja). Wykrywane sekwencje genowe to zwykle ORF1ab, E, N, RdRp lub S, w różnych kombinacjach. Testy te różnią się czułością, stabilnością oraz czasem bada-nia, który trwa zwykle kilka godzin.

BioMaxima zakończyła prace nad zestawem do diagno-styki genetycznej RT-PCR, opartym o rekomendowany przez WHO protokół. Odpowiednia dokumentacja została już złożona w Urzędzie Rejestracji Produktów Leczniczych, Wyrobów Medycznych i Produktów Biobójczych (URPLW-MiPB). Jesteśmy bardzo zadowoleni z uzyskanych wyników badań walidacyjnych przeprowadzonych w Hiszpani, w na-rodowym ośrodku referencyjnym (Institute of Health Car-los III), które potwierdziły wysoką czułość i specyficzność zestawu – powyżej 99%. Dodatkową zaletą jest czas uzy-skania wyniku, nieprzekraczający 2 godzin, oraz możliwość transportu testów w temperaturze pokojowej.

METODY IMMUNOLOGICZNE

SEROLOGICZNE

Metody immunologiczne to oznaczenie antygenu lub przeciwciał IgG i IgM przeciw SARS-CoV-2 w próbkach krwi metodą chemiluminescencyjną na analizatorach, meto-dą ELISA (ang. enzyme-linked immunosorbent assay) albo szybkim testem immunochromatograficznym, niewymaga-jącym dodatkowej aparatury. Takim właśnie testem jest szyb-ki test do diagnostyszyb-ki COVID-19, wykrywający przeciwciała przeciwko SARS-CoV-2 w klasie IgM i IgG w próbkach krwi, który firma BioMaxima ma w swojej ofercie. Współpraca

z chińskimi naukowcami, gdzie dostęp do dodatnich pró-bek pacjentów uzyskano najwcześniej, umożliwiła firmie stosunkowo szybko opracowanie i walidację testu oraz reje-strację zgodnie z europejskimi regulacjami prawnymi. Test oznacza przeciwciała IgM i IgG przeciw SARS-CoV-2 w nie-wielkiej ilości (10–20 μl) krwi pełnej, surowicy lub osocza, ma wysoką czułość i specyficzność w porównaniu do refe-rencyjnej metody genetycznej, odpowiednio dla IgG jest to 100% i 98%, a dla IgM 85% i 96%. Szybki test jest wyrobem medycznym IVD, tylko do użytku profesjonalnego, i posia-da znak CE, co oznacza, że spełnia wymagania europejskiej dyrektywy 98/79/EC, a w marcu 2020 roku został zgłoszony do URPLWMiPB. Jest przeznaczony do zastosowania w pro-fesjonalnym laboratorium diagnostycznym, procedura jego wykonania jest stosunkowo prosta, ale na wynik składa się nie tylko samo wykonanie testu – to diagnosta musi ocenić wartość dostarczonego materiału (czy został prawidłowo po-brany/dostarczony), a następnie po wykonaniu samego testu ocenić jego wartość diagnostyczną. W ocenie tej najważniej-sze są kompetencje i doświadczenie diagnosty laboratoryjne-go. On podejmuje decyzję, czy uzyskany wynik jest podstawą do dalszych działań.

Rozstrzygające jest badanie genetyczne, jednak i ta me-toda wiąże się z ryzykiem fałszywie ujemnego wyniku (sta-bilność RNA wirusa po pobraniu, podczas przechowywania i transportu materiału do laboratorium).

Obecna sytuacja wymaga ogromnej odpowiedzialności, rozsądku i wykorzystania wszystkich możliwych środków w zwalczaniu pandemii, między innymi szybkiej diagno-styki przesiewowej jako alternatywy dla pomiaru tempera-tury i wywiadu epidemiologicznego. Szerokie zastosowanie szybkiego testu na obecność IgM i IgG może umożliwić ty-powanie większej liczby pacjentów do izolacji oraz dalszej diagnostyki genetycznej.

Żadne z tych badań, w przypadku wyniku ujemnego ze względu na niewystarczającą ilość markera, nie wyeliminu-je ryzyka, że choroba pojawi się już po pobraniu materia-łu. W przypadku wyników ujemnych, ale nadal utrzymu-jących się objawów i podejrzenia kontaktów z osobami za-rażonymi SARS-CoV-2, decyzja o dalszych działaniach jest podejmowana przez nadzór epidemiologiczny. Test serolo-giczny może być wykorzystywany do monitorowania choro-by COVID-19 – badając obecność przeciwciał, można (przy uwzględnieniu obserwacji objawów klinicznych) określić Artykuł jest dostępny na zasadzie dozwolonego użytku osobistego. Dalsze rozpowszechnianie (w tym druk i umieszczanie w sieci) jest zabronione i stanowi poważne naruszenie przepisów prawa autorskiego oraz grozi sankcjami prawnymi.

(2)

FORUM ZAKAŻEŃ 2020;111

50 © Evereth Publishing, 2020

czy chory został już wyleczony i może zostać wypisany do domu. Niestety w Chinach zdarzały się przypadki zgonów pacjentów, którzy zostali zbyt szybko uznani za wyleczo-nych. W celu ochrony personelu medycznego przesiewowo można testować pracowników ochrony zdrowia, którzy zaj-mują się zarażonymi pacjentami, a także personel medycz-ny opiekujący się chorymi z obniżoną odpornością, na przy-kład na oddziałach onkologicznych czy transplantologicz-nych, w celu ochrony tych pacjentów.

NAJWAŻNIEJSZE JEST WYKONYWANIE JAK

NAJWIĘKSZEJ LICZBY TESTÓW

Takie podejście zastosowano w Singapurze i w Korei Po-łudniowej. W Singapurze testowano każdy przypadek zapa-lenia płuc oraz wszystkie przypadki nawet łagodnych obja-wów grypy. W Korei w ogniskach epidemii testy wykonywa-no praktycznie u każdego, na przykład przeprowadzawykonywa-no te-stowanie (ang.) drive-through bez wysiadania z samochodu,

a także w zakładach pracy. Przesiewowe testowanie umożli-wiło ograniczenie śmiertelności w Korei do 0,5%, ale też zi-dentyfikowano dużo więcej zakażeń.

Doświadczenie krajów azjatyckich pokazuje, że państwa, które skutecznie walczą z epidemią, niekoniecznie stosowa-ły się do zaleceń WHO, ale postawistosowa-ły sobie cel, aby przepro-wadzać test u możliwie jak największej liczby osób.

JAKIE JEST ZAINTERESOWANIE TESTAMI DO

DIAGNOSTYKI COVID19?

Obserwuje się duże zainteresowanie szybkimi testami immunochromatograficznymi ze strony publicznych i pry-watnych zakładów opieki zdrowotnej, laboratoriów, szpi-tali, jednostek samorządu, uczelni, zakładów pracy. Zamó-wienia otrzymujemy także od naszych dystrybutorów za-granicznych. Test genetyczny SARS-CoV-2 Real Time PCR LAB-KITTM_{został wprowadzony do oferty dopiero kilka}

dni temu, a już zauważyliśmy podobną skalę zamówień.

} BARBARA MICHALSKA

Dyrektor ds. Mikrobiologii Klinicznej BioMaxima S.A.,

ul. Vetterów 5, 20-277 Lublin, e-mail: b.michalska@biomaxima.com

Artykuł jest dostępny na zasadzie dozwolonego użytku osobistego. Dalsze rozpowszechnianie (w tym druk i umieszczanie w sieci) jest zabronione i stanowi poważne naruszenie przepisów prawa autorskiego oraz grozi sankcjami prawnymi.