Elektrofizjologiczne badania neuronalnych mechanizmów
plastyczności kory baryłkowej myszy w ywołanych uczeniem się
K rzysztof Tokarski', Joan na Urban-Ciećko', G rzegorz H ess u
1 Instytut Farmakologii, PAN, Kraków
2 Instytut Biologii Doświadczalnej im. N enckiego, PAN, W arszaw a ! Instytut Zoologii, Uniwersytet Jagielloński, Kraków
Streszczenie
Aw ersyjne warunkow anie klasyczne, polegające na skojarzeniu stymulacji dotykowej jedn eg o z rzędów wibrys, jako bodźca warunkow ego (CS), z szokiem elektrycznym w ogon, jak o bodźcem bezwarunkowym (UCS), wywołuje powiększenie rozmiarów funkcjonalnych reprezentacji stym ulowanych wibrys w korze som atosensorycznej myszy, co wykazano przy zastosowaniu pom iarów aktywności m etabolicznej tkanki nerwowej [13]. Efekt ten ma charakter uczenia asocjacyjnego. Dane literaturowe wskazują, źe po zakończeniu treningu, w obszarach stanowiących reprezentacje stym ulowanych wibrys dochodzi do wzrostu poziomu m arkerów GABAergicznego przekaźnictw a synaptycznego. Jak dotąd, brak jed nak danych na temat modyfikacji funkcji neuronów korowych i ich połączeń, które m ogą być efektem zmian plastycznych. Celem wykonanych badań było określenie, które elementy sieci neuronalnej kory som atosensorycznej ulegają modyfikacjom w efekcie aw ersyjnego warunkow ania klasycznego. Badania prowadzone były metodami rejestracji elektrofizjologicznej ex vivo z pojedynczych neuronów whole-cell patch-clam p w skrawkach kory som atosensorycznej myszy, poddanych wcześniej warunkowaniu aw ersyjnem u. W pierwszym etapie badań przeprow adzono charakterystykę elektrofizjologiczną glutam inianergicznych neuronów pobudzających i G ABAergicznych neuronów ham ujących. N astępnie rejestrowano postsynaptyczne prądy ham ujące i pobudzające, powstające spontanicznie. Uzyskane wyniki wykazały, że w arunkow anie aw ersyjne nie spowodow ało zmian podstawowych parametrów elektrofizjologicznych komórek GA BAergicznych i glutam inianergicznych. w skraw kach kory pochodzących z mózgów zw ierząt poddanych uprzednio procedurze warunkow ania klasycznego. W ykazano, że warunkowanie klasyczne nasiliło częstotliwość spontanicznych postsynaptycznych prądów ham ujących (sIP SC) rejestrowanych w kom órkach glutam inianergicznych w skrawkach kory pochodzących z mózgów zw ierząt poddanych procedurze warunkow ania klasycznego. W przeciw ieństwie do tego, nie stwierdzono istotnych zm ian w częstotliwości
spontanicznych postsynaptycznych prądów pobudzających (sEPSC) rejestrow anych w komórkach GABA i glutam inianergicznych. Wyniki te potw ierdzają hipotezę o nasileniu przekaźnictwa synaptycznego w połączeniach pom iędzy interneuronami GABAergicznym i a neuronam i pobudzającym i, powstającym w efekcie treningu.
Zaobserw ow ane nasilenie przekaźnictwa G AB Aergicznego stanowi, prawdopodobnie, wyraz adaptacyjnej modyfikacji sieci neuronalnej połączeń pomiędzy neuronam i baryłki, której sens polega na zapew nieniu niezbędnej równowagi pom iędzy przekaźnictwem pobudzającym a hamującym w zm ienionych warunkach, związanych z awersyjnym w arunkowaniem klasycznym. M echanizm zaobserwow anych zm ian nie jest znany i wymaga dalszych badań.
Wstęp
Korę m ózgow ą ssaków charakteryzuje organizacja kolum nowa, która przejawia się w postaci wybiórczej reakcji kom órek nerwowych, położonych w wąskim obszarze zorientowanym prostopadle do powierzchni kory poprzez wszystkie jej warstw y, na działanie bodźca o określonej charakterystyce. U gryzoni, część kory som atosensorycznej zawierająca reprezentacje wibrys, będących długim i wąsam i zatokowym i wyrastającym i na pyszczku i pełniących u tych zw ierząt funkcję ważnego narządu czuciowego, nosi nazwę pola baryłkowego. W w arstwie IV pola baryłkowego w ystępują charakterystyczne skupiska neuronów, z racji kształtu nazwane baryłkam i, z których każda otrzym uje pośrednio połączenia, w przeważającej m ierze z pojedynczej, przeciwstronnej wibrysy [20]. Charakterystyczna organizacja układu wibrys na pyszczku zw ierzęcia, na tzw. poduszce wibrysowej, w której w yróżnia się regularne rzędy i kolum ny, je st w sposób topograficzny odzw ierciedlona w korze baryłkowej w postaci układu baryłek. Neurony w arstw położonych powyżej i poniżej baryłki rów nież reagują najsilniej na pobudzanie jed nej, określonej wibrysy, tworząc wspólnie kolum nę baryłkową, stanow iącą reprezentację korow ą tej wibrysy i przetw arzającą inform ację dotykową, pochodzącą z tej wibrysy.
Badania nad uczeniem się i pamięcią, oraz leżącym i u ich podłoża zjawiskam i reorganizacji funkcjonalnej i anatomicznej szeregu struktur mózgu, stanowią jed en z głównych nurtów współczesnej neurobiologii. Z uwagi na łatwość, z ja k ą m ożna w ybiórczo pobudzać określone w ibrysy, oraz na m ożliwość stosow ana depryw acji sensorycznej poprzez usuw anie wybranych wibrys, kora baryłkowa gryzoni stała się obiektem licznych badań dotyczących zarówno plastyczności rozwojow ej, jak i plastyczności kory m ózgowej zw ierząt
dorosłych. N ajczęściej, m echanizm plastycznych reorganizacji kory przypisuje się zależnym od aktywności neuronalnej m odyfikacjom przekaźnictwa glutam inianergicznego w połączeniach w ewnątrzkorow ych [9, 6, 5].
Sugeruje się także istotny udział układu GABA ergicznego w m echanizm ach plastycznych reorganizacji pól recepcyjnych kory som atosensorycznej. Badania zespołu prof. M ałgorzaty Kossut z Instytutu Nenckiego w W arszawie, oparte o pom iar aktyw ności m etabolicznej kory mózgowej przy zastosow aniu autoradiografii znakow anej 2-deoksyglukozy wykazały, że trening, polegający na skojarzeniu stym ulacji dotykowej jed nego z rzędów wibrys, jako bodźca w arunkowego (CS), z Szokiem elektrycznym w ogon, jak o bodźcem bezwarunkow ym (UCS), w ywołuje powiększenie rozmiarów reprezentacji korowych stymulow anych wibrys [12J. Efekt ten ma charakter uczenia asocjacyjnego, ponieważ nie w ystępuje on u zw ierząt otrzymujących jedy nie bodziec warunkowy, ani u zw ierząt, które otrzym ują obydwa bodźce, lecz w sposób nieskoordynowany (pseudowarunkow anie). W 24 godziny po zakończeniu trzydniowego treningu, trw ającego 10 minut dziennie, zaobserw ow ano dw ukrotny wzrost liczby neuronów , wykazujących im m unoreaktyw ność GABA, w baryłkach stanowiących reprezentacje stym ulow anych wibrys [13]. W zrostowi liczby neuronów GABA- im munoreaktywnych towarzyszył wzrost poziomu mRNA oraz białka głównego enzymu syntetyzującego GABA, dekarboksylazy kwasu glutam inowego, GAD-67 [7], lecz nie GAD-65 [11]; wykazano także wzrost poziom u mRNA podjednostki alfa 1 receptora GA BAa w baryłkach [10]. Pow staw anie zmian w obrębie układu GA BAergicznego wykazano rów nież w innym modelu doświadczalnym , w którym w ibrysy myszy poddaw ano stym ulacji m echanicznej przez 4 dni 119]. W efekcie takiej stym ulacji zaobserw ow ano nasilenie imm unoreaktywności GAD, a także zw iększenie liczby synaps GA BAergicznych i nasilenie długolatencyjnych odpowiedzi na pobudzanie wibrys [8].
Jak dotąd, brak jedn ak danych na tem at funkcjonalnej modyfikacji neuronów korowych i ich połączeń, które m ogą być efektem zm ian plastycznych. Celem przeprowadzonych badań było określenie za pom ocą metod elektrofizjologicznych, które elementy sieci neuronalnej kory som atosensorycznej ulegają funkcjonalnym modyfikacjom w efekcie w efekcie aw ersyjnego w arunkow ania klasycznego.
Metodyka badań
Trening zwierząt i grupy dośw iadczalne
Projektowane dośw iadczenia wykonywane były na sam icach myszy Swiss, w wieku 3 tygodni na początku eksperymentu. W początkowej fazie
myszy były unierucham iane przez 1 0 m inut dziennie, przez okres 2 - 3 tygodni [12]. Po w ystąpieniu habituacji, myszy były poddawane treningowi, polegającem u na stym ulacji mechanicznej rzędu w ibrys B, po jed nej stronie ciała, przy pom ocy niew ielkiego pędzelka, trzykrotnie w czasie 9 sekund. Stanowi to bodziec warunkow y (CS). W ostatniej sekundzie trw ania bodźca warunkow ego, na ogon myszy podawany był szok elektryczny (0.5 niA, 0.5 sek), stanow iący bodziec bezwarunkowy (UCS). Po 6 sekundach przerwy CS i UCS były powtarzane, a całość sesji treningowej trw ała 10 minut. Sesję powtarzano przez 3 kolejne dni. Druga grupa zw ierząt otrzym ywała tylko CS a trzecia, kontrolna („naive”) grupa myszy nie otrzymywała bodźców.
Doświad czenia elektrofizjologiczne.
W 24 godziny po zakończeniu treningu, po dekapitacji zw ierzęcia, wypreparow ano mózg z czaszki i zanurzano w zimnym (0°C) sztucznym płynie mózgowo-rdzeniow ym (ACSF) o następującym składzie (m M): NaCl 126, KCI 4, KH2PO4 1.25, N a H C 03 26, M gSÛ4 1.3, CaCl2 2.5, D-glukoza 10, przedm uchiwanym m ieszaniną 9 5 % 02 - 5 % C 0 2. Skrawki, o grubości 400 ц т , wycinano przy pom ocy mikrotomu z wibrującym ostrzem z obszaru odpow iadającego korze baryłkow ej, w płaszczyźnie nachylonej pod kątem 5 5° w stosunku do płaszczyzny strzałkowej [3, 15], co pow oduje, że w obrębie skrawka znajdu ją się baryłki, zaliczające się do 5 rzędów (A - E). Po preparatyce, skrawki przechowyw ane były w kom orze inkubacyjnej wypełnionej ACSF, w tem peraturze 32°C, przez okres 1 - 6 godzin. Pojedynczy skrawek przenoszono do komory rejestracyjnej, umieszczonej na podstaw ie mikroskopu Zeiss A xioskop, przepłukiwanej ACSF w tem peraturze 32 °C. W świetle przechodzącym , pod małym powiększeniem , możliwa była identyfikacja poszczególnych baryłek (ryc. 1A). Po zastosowaniu m etody różnicow ego kontrastu interferencyjnego w podczerwieni (1R-DIC) i obiektyw u 40x identyfikowano pojedyncze neurony (ryc. IB).
M ikropipetę szklaną, w ypełnioną roztworem (mM): K -gluconate 130, NaCl 5, CaCl2 0.3, M gCl2 2, EGTA 1, HEPES 10, Na2-ATP 5, Na-GTP 0.4; o osm olarności 290 mOsm; pH 7.2, o oporności 6 - 8 M Q, zainstalow aną na m ikromanipulatorze Burleigh, pod kontrolą w zrokow ą um ieszczano na powierzchni neuronu i doprowadzano do pow stania złącza w ysokooporow ego (ang- gigaseal) a następnie błonę neuronu przeryw ano [14]. Po uzyskaniu charakterystyki elektrofizjologicznej badanej komórki, poprzez podanie serii bodźców hiper- i depolaryzujących, od -0,5 do +0,5 nA (ryc. 1C, D), przechodzono w tryb rejestracji voltage-clamp. Rejestrację slPSC (ryc. 2A) prowadzono przy potencjale błony komórki ustalonym na 0 mV a sEPSC (ryc. 2B, C) przy potencjale błony komórki ustalonym na -75 mV. Sygnały odbierano przy pomocy w zmacniacza NPI SEC 05L, rejestrowano przy pom ocy
przetw ornika analogow o/cyfrow ego Axon Instrum ents Digidata 1322, współpracującego z kom puterem PC, i analizowano przy użyciu oprogram ow ania pCLA M P (Axon Instruments).
Wyniki
Elektrofizjologiczna charakterystyka badanych kom órek
Łącznie przeprow adzono rejestracje z 135 neuronów warstw y IV kory, wykazujących w łaściw ości elektrofizjologiczne charakterystyczne dla kom órek glutam ininanergicznych, generujących regularnie potencjały czynnościow e (ang.
regular spiking-, [2]; ryc. 1C) oraz 37 neuronów warstwy IV kory, wykazujących
właściw ości elektrofizjologiczne charakterystyczne dla interneuronów szybko w yładowujący się (ang. fast-spiking; ryc. ID). Uzyskane wyniki wykazały, że warunkow anie aw ersyjne nie spowodowało zmian m ierzonych param etrów elektrofizjologicznych (oporność błony komórkowej i potencjał spoczynkowy) komórek GABA i glutam inianergicznych. w skrawkach kory pochodzących z mózgów zw ierząt poddanych procedurze warunkow ania klasycznego (tab. 1).
А
В
C
D
10 mV 0.3 nA
J '--- 100 m s
R yc . 1. (A ) S kraw ek k ory m ózgow ej m yszy z w idocznym i baryłkam i. S ka la 4 00 ц т . (В ) N eurony w arstw y IV kory ba ryłkow ej m yszy, o braz uz yskany przy użyciu IR -D IC . W id o czn a je s t ko ńc ów k a m ikrop ip ety rejestrując ej, um ieszcz ona n a pow ierzc hni kom órki g luta m inianergiczn ej. W id oczn e ró w nież 2 inne kom órk i o odm ienn ym kształcie, p raw d op o d ob n ie in terneurony G A B A ergic zne. Skala: 10 ц т . (С ) O d po w ied ź kom órki g luta m in ian erg iczn ej i (D ) intern euronu szybko w yła dow ują ceg o się (ang. fa st-s p ik in g ) na de pola ryzują ce bo dź ce prądow e.
N
e
u
ro
n
y
g
lu
ta
m
in
ia
n
e
rg
ic
z
n
e
(re
g
u
la
r
s
p
iki
n
g
)
N
a
ïv
e
C
S
C
S+U
C
S
b
a
rył
ka
В
b
a
rył
ka
D
b
a
ry
łk
a
В
b
a
ry
łk
a
D
b
a
ry
łk
a
В
b
a
rył
k
a
D
n
=
2
7
/7 = 2 1 /7 =1
9
n
=
1
5
/7=
2
4
n
=
2
9
V
m
(m
V
)
-7
4
±
1
-7
4
±
1
-7
5
±
1
-7
6
±
1
-7
6
±
1
-7
5
±
1
R m(M
D
)
1
7
6
±
1
5
1
6
7
±
1
2
1
7
0
±
1
2
1
8
3
±
9
1
7
8
±
9
1
8
0
±
9
N
e
u
ro
n
y
G
A
B
A
e
rg
ic
z
n
e
(f
a
st
sp
ik
in
g
)
N
a
ïv
e
C
S
C
S+U
C
S
b
a
rył
ka
В
b
a
ry
łk
a
D
b
a
rył
k
a
В
b
a
rył
k
a
D
b
a
rył
ka
В
b
a
rył
k
a
D
n
=
3
n
=
5
/7
=
6
/7=
5
/7
=
1
1
/7=
7
V
m
(
m
V
)
-7
0
±
1
-6
6
±
2
-6
7
±
1
-6
6
±
1
-6
9
±
1
-6
8
±
1
R m ( M Q )1
0
8
±
2
3
8
9
±
2
9
1
2
0
±
5
0
7
8
±
1
3
9
8
±
5
1
1
0
±
1
0
T a b . 1 . P o ró w n a n ie w ła śc iw o śc i e le k tr o fi z jo lo g ic z n y c h z id e n ty fi k o w a n y c h n e u ro n ó w g lu ta m in ia n e rg ic z n y c h i G A B A e rg ic z n y c h w b a ry łk a c h В i D w k o rz e so m a to se n so ry c z n e j p rz e b a d a n y c h z w ie rz ą t, n a iv e m y sz y k o n tr o ln e ; C S m y sz y , n a k tó re d z ia ła n o t y lk o b o d ź c e m w a ru n k o w v m : C S + U C S m v sz v t re n o w a n e .Rejestracja sIPSC z kom órek glutam inianergicznych
W arunkowanie aw ersyjne nasiliło częstotliw ości sIPSC, natom iast nie zm ieniło am plitudy sIPSC (ryc. ЗА) w komórkach glutam inianergicznych w baryłce odpow iadającej głaskanym wibrysom. W przeciw ieństw ie do tego, nie stw ierdzono istotnych zm ian amplitudy sIPSC, które byłyby skorelowane z procedurą warunkow ania, (ryc. ЗА)
В
1 sR y c. 2. Przyk łady re jestrac ji (A) sIPSC , (B) sE P SC w ne uro nac h p obu dz ają cyc h i (C ) sE PS C w inte rneu ron ac h w arstw y IV kor}' baryłkow ej
Rejestracja sEPSC z kom órek glutam inianergicznych
W arunkow anie aw ersyjne nie wpłynęło na częstotliwość i amplitudę sEPSC w kom órkach glutam inianergicznych w baryłce odpow iadającej głaskanym wibrysom (ryc. 3B).
Rejestracja sEPSC z kom órek G A BAergicznych
W arunkowanie aw ersyjne nie wpłynęło na częstotliw ość i amplitudę sEPSC w komórkach GABAergicznych w baryłce odpow iadającej głaskanym wibrysom (ryc.3D).
ю Ł 8 чО fi '(Л ° О I * о (Л о Q> ^ N О о В ю X 8 •О ■ ф 6 i
I 4
to 28
30 N 25 ю 20 -слi 15
О 10 <л ev с N э О 0 12 В D naiveI
В D naive JL В D C S I B D CS 1 B D naive в D CS 13 B D CS +ucs
16 B Des
+ucs
B Des
+ucs
100 s 80 -S 60 D “3 . 40 E W 20 30 ^ 2 5 < 0.2° T3 15 30 25 < O. 20 ПЗ ТЭ 15 3 Q. 10 E 03 5 JL,1
Д, B D B D naive CS B D B D naive CS X в D C S + UCS Д, ± B D CS + UCS B D B D B D naive CS C S + UCSR y c 3. W pływ w arun ko w an ia a w ers yjnego na (A ) sIP SC w n eurona ch p obu dza jąyc h w arstw y IV kory baryłkow ej. C zęs totliw o ść sIP SC w neu ronach baryłki В m yszy tren ow any ch j e s t ok. dw ukrotn ie w y ższa niż w p ozos tałych gru pach, róż nic e średniej a m plitu dy sIPS C m iędzy grupam i nie są zw iąz ane z treningiem . (B ) sE PSC w neuronach po bud zając yc h w arstw y IV kory baryłkow ej. W arunk ow anie aw ers yjne nie w pły nęło na czę stotliw o ś ć i a m p litud ę sE PSC w ne uro nac h baryłki В m yszy trenow anych .(C ) sE PS C w in terneu ron ac h w arstw y IV kory baryłkow ej. W arunk ow a nie aw ersyjn e nie w płynę ło n a czę sto tliw o ść i am plitu dę sE PS C w in tern eu ro na ch baryłki В m ysz y trenow anych.
naive - m yszy ko ntro lne ; C S - m yszy, na które dz iałano tylko bod źcem w arun kow ym ; C S+ U C S - m yszy trenow ane. *** /4 0 .0 0 0 1 , AN OV A.
Dyskusja
Przeprow adzone doświadczenia w stępne wykazały, że w efekcie treningu ulega powiększeniu częstotliwość slPSC, rejestrow anych z neuronów pobudzających o regularnej aktywności (kom órek gwiaździstych i piram idowych). Brak istotnych zm ian średniej am plitudy rejestrowanych slPSC wskazuje, że m echanizm postsynaptyczny tego efektu, zw iązany np. z m odyfikacjam i w łaściw ości receptorów G ABAa jest mniej praw dopodobny. Spontaniczne 1PSC pow stają w efekcie dwóch procesów: uw alniania pakietów (kw antów ) neuroprzekaźnika w sposób zależny od potencjałów czynnościowych oraz uw alniania w sposób niezależny od aktywności neuronu. W drugim przypadku, pow stające prądy określa się jak o m iniaturowe (mIPSC). U podłoża nasilonego uwalniania GABA może leżeć, hipotetycznie, zwiększona aktywność interneuronów G ABAergicznych, np. w efekcie m odyfikacji pobudliwości błony tych kom órek, bądź silniejszego pobudzeniow ego w ejścia synaptycznego. Jednakże uzyskane wyniki wykazujące brak wpływ u warunkow ania aw ersyjnego na w artość potencjału spoczynkowego, oporność błony komórkowej przebadanych interneuronów oraz częstotliw ość sEPSC zarejestrow aną w komórkach GABAergicznych w ydają się przeczyć tej hipotezie.
Alternatywnym w yjaśnieniem zaobserwowanego wzrostu częstotliwości slPSC jest zwiększenie praw dopodobieństwa uwalniania lub liczby m iejsc uwalniania GABA. S ugerują to prace wykazujące w zrost liczby neuronów f 13] lub liczby synaps GA BAergicznych [8] w baryłkach stanowiących reprezentacje stym ulowanych wibrys
Nasilone uwalnianie acetylocholiny z zakończeń włókien projekcji z podstawnego przodom ózgowia do kory może stanowić jeden z kluczow ych elem entów m echanizm u w yw ołania plastycznych reorganizacji kory som atosensorycznej [4]. W ykazano, że plastyczność odpow iedzi neuronów kory baryłkowej na stym ulację w ibrysy jest blokowana przez im munotoksyczne uszkodzenie jąd ra podstawnego M eynerta [1] a stym ulacja elektryczna podstawnego przodom ózgowia, sparow ana ze stym ulacją receptorów skórnych, w ywołuje długotrw ały w zrost am plitudy potencjałów w ywołanych w korze som atosensorycznej [16]. Badania odpowiedzi neuronów kory słuchowej wykazały, że plastyczne zmiany pól recepcyjnych w efekcie apetytywnego lub aw ersyjnego w arunkow ania klasycznego są uzależnione od aktywacji jądra podstaw nego i projekcji cholinergicznej do kory [18]. Dlatego też można przypuszczać, że w ywołanie zaobserwowanego nasilenia uw alniania GABA przez interneurony kory baryłkowej, związanego z warunkowaniem klasycznym , jest przynajm niej częściow o oparte o aktywację układu cholinergicznego
Piśmiennictwo
1. B askervillc, K.A., Sc hw eitzer, J B., H erron, P. (1997) E ffects o f ch o lin e rg ic dep letio n on e xp erien ce -d ep e nd ent plas ticity in the cortex o f the rat. N e ur osc ie nc e 80, 1159-1169.
2. B eierlein, M., G ibson , J.R ., C o nno rs, B.W . (2 003 ) T w o d yna m ically d istinc t inhibitory netw orks in lay er 4 o f the neocortex. J. N europ hysiol. 90, 2 98 7-3 000 .
3. C h m ielow sk a, J., C arvell, G .E ., Sim ons, D.J. (1989) Spatial o rga nizatio n o f thalam ocortical and co rticotha la m ic pro jectio n system s in rat Sm l ba rrel cortex. ./. Comp. N eurol. 285, 325- 338.
4. 4 .Dykes, R.W. (1 997 ) M e chanis m s c ontrollin g neuronal plastic ity in so m a tosen sory cortex. Can. J. Physiol. Pha rm acol. 75 :535-5 45.
5. Foelle r, E., Fe ldm an , D.E . (2004) Syn aptic basis for de velo pm enta l plas ticity in so m a tosen sory corte x. Curr. Opin. N eurobiol. 14, 89-95.
6. Fox, K. (20 02) A natom ical pathw ays and m o lecula r m echanism s for plas ticity in the barrel cortex. N eu ro sc ien ce 111, 799-8 14.
7. G ierdals ki, M ., Ja bło ńska , В., Siuc inska, E., L ech, M., Sk ibiń ska , A., K o ssut, M. (2001) R apid re gu latio n o f G A D 67 m RN A and protein level in cortical ne uron s a fter sensory learning. C ereb. C orte x 11, 806-815.
8. K nott, G .W ., Q ua iria ux , C., G enoud, C., W elker, E. (200 2) Fo rm ation o f de nd ritic spines with G A B A ergic synapses ind uced by w hisker stim ulation in ad ult m ice. N eur on 34, 26 5-273 9. K ossut, M. (199 8) E xperien ce -d epe nd en t c hang es in func tion and anatom y o f ad ult barrel
cortex. Exp. B rain Res. 123, 110-116.
10. L ech, M ., Sk ibińska , A., K ossut, M. (2001) D elayed u preg ulation o f G A B A a a lp h a l re cep tor su b un it m R N A in so m a tosen sory cortex o f m ice follow ing lea rn ing -d ep e nd en t p las tic ity o f cortica l repre sen tations . M ol. B rain Res. 96, 82-86
11. Lech, M ., Skibińska , A., Siucińs ka, E., Kossut, M. (2 005 ) L ea rnin g-in du ced plastic ity o f cortical re pre sen tatio ns do e s not affect G AD 65 m RN A e xpre ssio n and im m un olab elin g o f c on ic a l ne urop il. B ra in Res. 1044, 26 6-271.
12. Siuc insk a, E., K os sut, M. (1996 ) Sh ort-las ting classical co n d ition in g induc es reversible ch ange s o f re pre sentation al m aps o f vibrissae in m ouse SI cortex A 2DG study. C ereb C ortex 6, 506 -513.
13. Siucins ka E., K ossul M., Stew art M .G. (1999) G A BA im m un ore activily in m ouse barrel field after aversive and app etitiv e classical c on ditionin g tra inin g invo lving facial v ib ris sa e. B rain
R es .843, 62-70.
14. T okars ki, K., Z aho rod na, A., Bobula, B., Hess, G. (20 03) 5-H T 7 re cep tors increas e the ex citability o f rat h ipp oca m p al CA1 pyram idal neurons. B ra in Res. 993 , 230 -234 .
15. U rb an-C iećk o, J., K os sut, M ., Hess, G. (2 005 ) E ffects o f se nsory lea rn ing in intracortical synap tic trans m iss io n in the berrl cortex o f m ice. A c ta N e urobiol. E xp. 65, 195-200.
16. V erdier, D., Dykes, R.W. (2 001) L ong-term c holin ergic en han cem e nt o f e vo ke d p otentials in rat h ind lim b so m a tosen sory co rtex displays characteris tics o f lo ng-term p otentiatio n. Exp.
B rain R es. 137, 71-82.
18. W e inberge r, N.M . (200 3) T h e nucle us basalis and m em ory codes: A ud itory cortical plasticity and the ind uction o f spec ific, associative behavioral m em ory. N e uro bio l. Learn. M em. 80, 268-2 84.
19. W elker, E., Soriano , E., V an d er L oos, H. (1989) Plasticity in the barrel co rtex o f the adult m ouse: tra ns ie nt increas e o f G A D -im m unoreactivily follow ing sen so ry stim ulation . Exp. B ra in Res. 78, 659-664.
20. W oolsey, T .A .,V an d er L oos, H. (1970) T he structu ra l org an iz ation o f layer IV in the so m a tos ens ory regio n (SI) o f m ouse cerebral cortex. B rain Res. 17, 205 -242 .
A dres do k o re sp o n de nc ji: G rz e g o rz H ess Instytut Z oologii U niw e rsytet Jagielloński ul. Ing arden a 6 3 0-0 60 K rakow T el.: (48 1 2 )6 6 2 32 12
