WYNIKI I DYSKUSJA

:SUDF\WHVWRZDQRV]F]HS\GRZ]URVWXZREHFQRĞFL-dioksanu jako jedynego ĨUyGáDRUD]ZREHFQRĞFLLQQHJR]ZLą]NXMDNRVXEVWUDWXZ]URVWRZHJRW celu doboru szczepu zdolnego do degradacji 1,4-dioksanu przeprowadzono testy z wykorzystaniem Stenotrophomonas maltophilia KB2, Rhodococcus erythropolis KB4, Pseudomonas sp. E-93486 oraz Pseudomonas putida mt-2. Szczepy te wybrano na podstawie

wcze-ĞQLHMV]\FK EDGDĔ NWyUH GRZLRGá\ REHFQRĞFL PRQR LFK NRPyUNDFK

6SUDZG]RQRF]\V]F]HS\PDMą]GROQRĞüGR

ĨUyGáDZĊJODLHQHUJLL OXEMDNRVXEVWUDWXQLHZ]URVWRZHJRZXNáDG]LHNRPHWDEROLF Q\P]LQQ\P]ZLą]NLHPMDNRVXEVWUDWHPZ]URVWRZ\P3U]HSURZDG]RQRUyZQLHĪHN SHU\PHQW\ PDMąFH Z\ND]Dü F]\ PRĪOLZH MHVW Z\ NRPyUNDFK

EDNWHU\MQ\FK XNáDGX HQ]\PDW\F]QHJR QLH]EĊGQHJR GR GHJUDGDFML

SU]H] GRGDQLH WROXHQX MHGQHJR ] QDMF]ĊĞFLHM Z\PLHQLDQ\FK Z OLWHUDWXU]H ]ZLą]NX

SREXG]DMąFHJRSURGXNFMĊPRQR

NRPyUHNV]F]HSX ZREHFQRĞFL GLRNVDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD

+RGRZOĊV]F]HSX ]SUREyZHN]EXOLRQHPSU]HQLHVLRQR

KRGRZODQ\FK R REMĊWRĞFL  PO L SR X]XSHáQLHQLX SRĪ\ZNą GR 

FRMHVWGRZRGHPQDEUDNZNRPyUNDFKWHJRV]F]HSXHQ]\PyZXPRĪO ZLDMąF\FKGHJUDGDFMĊ GLRNVDQXMDNRMHG\QHJRĨUyGáDZĊJODRUD]EUDNPRĪOLZRĞFL

Z\LQGXNRZDQLDWHJRHQ]\PXSU]H]WROXHQXEDGDQ\FKNRPyUHN

EyZHNGREXWHOHN SRF]ąWNRZR 3RSLHUZV]\PSDVDĪX

RREMĊWRĞFLPOLX]XSHáQL QLX SRĪ\ZNą PLQHUDOQą GR  PO JĊVWRĞü RSW\F]QD ]DZLHVLQ\ NRPyUHN Z EXWH ]DF]ĊáD VSDGDü U\V  3U]\F]\Qą SRF]ąWNRZHJR Z]URVWX PRJá\ E\ü SR]RVWDáRĞFL

VXEVWUDWyZRGĪ\ZF]\FK]EXOLRQXNWyUHZ NROHMQ\PSDVDĪXXOHJá\Z\F]HUSDQLXDLFK

EUDN VSRZRGRZDá ]DWU]\PDQLH 1D WHM SRGVWDZLH PRĪQD Z\ZQL VNRZDüĪHZNRPyUNDFK( EUDNRZDáR HQ]\PyZQLH]EĊGQ\FK

GLRNVDQXLQLHPRĪQD E\áRWHĪSREXG]LüLFKSURGXNFML

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 77

QDSá\QQHMSRĪ\ZFHPLQHUDOQHMRVNáDG]LHRSLVDQ\PSU]H]*UHĔLZVSyáSUDFRZQLNyZ

NROHNFML .DWHGU\ %LRFKHPLL :\G]LDáX %LRORJLL L 2FKURQ\ ĝURG 8QLZHUV\WHWXĝOąVNLHJRZ

6NáDGSRĪ\ZNLKRGRZODQHMSU]HGVWDZLRQR

ZHZF]HĞQLHMV]\FKSUDFDFK>@

/LWHUDWXUDSRGDMHĪHQD]GROQRĞüV]F]HSyZGRGHJUDGDFML]ZLą]NyZRUJDQLF]Q\FK

ZSá\ZDVXEVWUDW ]NWyU\PE\á\SUH LQNXERZDQH:]ZLą]NX]SRZ\ĪV]\P]DVWRV ZDQRUyĪQHVXEVWUDW\QDSRF]ąWNRZ HWDSLHKRGRZOLNRPyUHN:FHOX

QLD PLNURRUJDQL]PyZ GR EDGDĔ NRPyUNL EDNWHU\MQH SU]HQRV]RQR ]H VNRVyZ

EyZHN]DZLHUDMąF\FKEXOLRQOXESRĪ\ZNĊ]JOXNR]ąOXESRĪ\ZNĊ

RGSRZLHGQLąSRĪ\ZNąPLQHUDOQąLGRGDZDQR y

SRGDMH OLWHUDWXUD QLHNWyUH V]F]HS\ GHJUDGXMąFH WROXHQ PDMą HQ]\P\ XPRĪOLZLDMąFH

UR]NáDG GLRNVDQXMDNRMHG\QHJRĨUyGáDZĊJOD

SRGMĊWRSUyEĊVSUDZG]HQLDF]\WHVWRZDQHV]F]HS\ PRĪQDSU]

VWRVRZDüGRZ]URVWX]WROXHQHPMDNRĨUyGáHPZĊ 1DVWĊSQLHV]F]HS.%SU]HQ V]RQRGRNROEDSR]RVWDáHV]F]HS\GREXWHOHNLX]XSHáQLDQRRGSRZLHGQLąSRĪ\ZNą

PLQHUDOQą DE\ X]\VNDü KRGRZOĊ R REMĊWRĞFL  PO 'R KRGRZOL GRGDZDQR RGS ZLHGQL]ZLą]HNMDNRĨUyGáRZĊJODUHJXOXMąFGDZNĊZ ]DOHĪQRĞFLRG]DSR

=DVWRVRZDQR PHWRGĊ WHPSHUDWXURZą WHPSHUDWXUą Z\MĞFLRZą E\áR Û& XWU]\PDQH

SU]H]  PLQXW\ SRWHP QDVWĊSRZDá Z]URVW WHPSHUDWXU\ R Û&P

Û&7HPSHUDWXUDLQMHFWRUDLGHWHNWRUDZ\QRVLáDÛ&*D]HPQRĞQ\PE\áKHO

1DVWĊSQ\P HWDSHP EDGDĔ PLDáR E\ü VSUDZG]HQLH

REHFQRĞFLWROXHQXEĊGąZVWDQLHGHJUDGRZDü GLRNVDQMDNRMHG\QHĨUyGáRZĊJOD

XNáDG]LHNRPHWDEROLF]Q\P]WROXHQHP

:SUDF\WHVWRZDQRV]F]HS\GRZ]URVWXZREHFQRĞFL

ĨUyGáDRUD]ZREHFQRĞFLLQQHJR]ZLą]NXMDNRVXEVWUDWXZ]URVWRZHJR

ĞQLHMV]\FK EDGDĔ NWyUH GRZLRGá\ REHFQRĞFL PRQRoksygenazy w LFK NRPyUNDFK

6SUDZG]RQRF]\V]F]HS\PDMą]GROQRĞüGRbiodegradacji 1,4-dioksanu jako jedynego ĨUyGáDZĊJODLHQHUJLL OXEMDNRVXEVWUDWXQLHZ]URVWRZHJRZXNáDG]LHNRPHWDEROLFz- Q\P]LQQ\P]ZLą]NLHPMDNRVXEVWUDWHPZ]URVWRZ\P3U]HSURZDG]RQRUyZQLHĪHNs-SHU\PHQW\ PDMąFH Z\ND]Dü, F]\ PRĪOLZH MHVW Z\indukowanie w NRPyUNDFK

EDNWHU\MQ\FK XNáDGX HQ]\PDW\F]QHJR QLH]EĊGQHJR GR GHJUDGDFML 1,4-dioksanu po-SU]H] GRGDQLH WROXHQX MHGQHJR ] QDMF]ĊĞFLHM Z\PLHQLDQ\FK Z OLWHUDWXU]H ]ZLą]NX

SREXG]DMąFHJRSURGXNFMĊPRQRoksygenazy u bakterii.

Rys. 2. Wzrost NRPyUHNV]F]HSXmt-2 w kolbach ZREHFQRĞFL 1,4-GLRNVDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD Fig.2. The growth of mt-2 cells with 1,4-dioxane as the only carbon source

+RGRZOĊV]F]HSXPseudomonas putida mt-]SUREyZHN]EXOLRQHPSU]HQLHVLRQR

do butelek KRGRZODQ\FK R REMĊWRĞFL  PO L SR X]XSHáQLHQLX SRĪ\ZNą GR  ml dodawano 1,4-dioksan. Hodowle prowadzono 17 dni i nie stwierdzono przyrostu bio-masy (rys. 2), FRMHVWGRZRGHPQDEUDNZNRPyUNDFKWHJRV]F]HSXHQ]\PyZXPRĪOi-ZLDMąF\FKGHJUDGDFMĊ-GLRNVDQXMDNRMHG\QHJRĨUyGáDZĊJODRUD]EUDNPRĪOLZRĞFL

Z\LQGXNRZDQLDWHJRHQ]\PXSU]H]WROXHQXEDGDQ\FKNRPyUHNdlatego zaprzestano dalszej hodowli.

W przypadku szczepu Pseudomonas sp. E-93486, po przeniesieniu hodowli z pro-EyZHNGREXWHOHN, SRF]ąWNRZR stwierdzono wzrost absorbancji. 3RSLHUZV]\PSDVDĪX

(przeniesieniu hodowli do nowych, sterylnych butelek RREMĊWRĞFLPOLX]XSHáQLe-QLX SRĪ\ZNą PLQHUDOQą GR  PO JĊVWRĞü RSW\F]QD ]DZLHVLQ\ NRPyUHN Z EXWHlce ]DF]ĊáD VSDGDü U\V. 3 3U]\F]\Qą SRF]ąWNRZHJR Z]URVWX PRJá\ E\ü SR]RVWDáRĞFL

VXEVWUDWyZRGĪ\ZF]\FK]EXOLRQXNWyUHZ NROHMQ\PSDVDĪXXOHJá\Z\F]HUSDQLXDLFK

EUDN VSRZRGRZDá ]DWU]\PDQLH dalszego wzrostu. 1D WHM SRGVWDZLH PRĪQD Z\ZQLo-VNRZDüĪHZNRPyUNDFK(-93486 prawdopodobnie EUDNRZDáR HQ]\PyZQLH]EĊGQ\FK

do degradacji 1,4-GLRNVDQXLQLHPRĪQD E\áRWHĪSREXG]LüLFKSURGXNFML

0

Czas hodowli (doba)

78 (6=&=<5%$i inni

Rys. 3. Wzrost komórek szczepu E-93486 w kolbach ZREHFQRĞFL 1,4-diokVDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD (A) i SRSLHUZV]\PSDVDĪX%

Fig. 3. The growth of E-93486 cells with 1,4-dioxane as the only carbon source (A) and after the first passage (B)

Rhodococcus erythropolis KB4, podobnie jak szczep E- EH]SRĞUHGQLR SR

przeniesieniu z SUREyZHN GR EXWHOHN obserwowano Z]URVW NRPyUHN natomiast po SDVDĪXQDVWąSLáR]DKDPRZDQLHZ]URVWX, FRSR]ZROLáRZ\FLąJQąüSRGREQHZQLRVNLMDN

w przypadku szczepu E-93486 (rys. 4).

Rys. 4 Wzrost komórek szczepu KB4 ZREHFQRĞFL 1,4-diokVDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD(A) i po pierwszym SDVDĪX%

Fig.4. The growth of KB4 cells with 1,4-dioxane as the only carbon source (A) and after the first passage (B)

Wykresy RSLVXMąFHZ]URVWNRPyUHNV]F]HSX Stenotrophomonas maltophilia KB2 Z REHFQRĞFL -GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD SU]HGVWDZLDMą U\VXQNL 5 A i 5 B. Nie stwierdzono wzrRVWXEDGDQHJRV]F]HSXZREHFQRĞFL 1,4-GLRNVDQX:\NRQDQLHSDVDĪX

E\áR PRĪOLZH G]LĊNL GRĞü Z\VRNLHM OLF]ELH NRPyUHk uzyskanej po etapie hodowli

0

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

2WU]\PDQHZ\QLNLVXJHUXMąĪH XNáDG

 NWyU\ XPRĪOLZLDáE\ PX Z\NRU]\VWDQLH  GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD

ZREHFQRĞFL ĨUyGáDZĊJOD

SDVDĪX%

=JRGQLH ] OLWHUDWXUą ]GROQRĞü UR]NáDGX  GLRNVDQX PRĪQD Z\L GXNRZDü SU]\

 3RQLHZDĪ ZH ZF]HĞQLH V]\FKEDGDQLDFKVWZLHUG]RQRĪH

QLHSRWUDILąZ\NRU]\VW\ZDüWROXHQXMDNRĨUyGáDZĊJODGRGDQRWROXHQW\ONRGR

VNRVXZ\NRQDQRZSUREyZNDFK]DZLHUDMąF\FKEXOLRQR Ī\ZF]\SRĪ\ZNĊPLQHUDOQą]JOXNR]ą SRĪ\ZNĊPLQHUDOQą +RGRZOĊ

QD EXOLRQLH RGĪ\ZF]\P SR  SUREyZNL ] SRĪ\ZNą PLQHUDOQą

GRGDQRWROXHQ3RGREQHSRVWĊSRZDQLH]DVWRVRZDQRZSU]\SDGNXNRPyUHNKRGRZ Q\FK]JOXNR]ąMDNRVXEVWUDWHPRGĪ\ZF]\P'RGDQLHEXOLRQXLJOXNR]\PLDáRXPRĪ

OLZLüQDPQRĪHQLHNRPyUHNV]F]HSX.%DGRGDWNRZRZ\ND]DüF]\URG]DMVXEVWUDWX

RGĪ\ZF]HJR PRĪH ZSá\Qąü QD SRWHQFMDOQą GHJUDGDFMĊ WROXHQX 1D SRGVWDZLH SU]

SURZDG]RQ\FKSRPLDUyZVWZLHUG]RQRĪHWROXHQQLHPRĪHE\üVXEVWUDWHPRGĪ\ZF]\P ]RZDüSU]H]GQL ]HVNRVX GRSRĪ\ZNL PLQHUDOQHMGR

NWyUHMGRGDQRWROXHQZ\ND]Dá\SHZLHQZ]URVWQLHVWHW\E\áRQVáDE\L

1DSRGVWDZLHX]\VNDQ\FKZ\QLNyZPRĪQDVWZLHUG]LüĪHNRPyUNLV]F]HSX

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 79

ZREHFQRĞFL VDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD (A) i SRSLHUZV]\PSDVDĪX%

 EH]SRĞUHGQLR SR

SUREyZHN GR EXWHOHN Z]URVW NRPyUHN

SDVDĪXQDVWąSLáR]DKDPRZDQLHZ]URVWX FRSR]ZROLáRZ\FLąJQąüSRGREQHZQLRVNLMDN

ZREHFQRĞFL VDQXMDNRĨUyGáDZĊJOD(A) i po pierwszym SDVDĪX%

RSLVXMąFHZ]URVWNRPyUHNV]F]HSX

Z REHFQRĞFL  GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD SU]HGVWDZLDMą U\VXQNL

RVWXEDGDQHJRV]F]HSXZREHFQRĞFL GLRNVDQX:\NRQDQLHSDVDĪX

E\áR PRĪOLZH G]LĊNL GRĞü Z\VRNLHM OLF]ELH NRPyUH

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

w probówkach. 2WU]\PDQHZ\QLNLVXJHUXMąĪH szczep KB2 nie posiada XNáDGu enzy-matycznego NWyU\ XPRĪOLZLDáE\ PX Z\NRU]\VWDQLH -GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD

i energii.

Rys. 5. Wzrost komórek szczepu KB2 ZREHFQRĞFL 1,4-dioksanu jako ĨUyGáDZĊJOD (A) i po pierwszym SDVDĪX%

Fig.5. The growth of KB2 cells with 1,4-dioxane as the only carbon source (A) and after the first passage (B)

=JRGQLH ] OLWHUDWXUą ]GROQRĞü UR]NáDGX -GLRNVDQX PRĪQD Z\LnGXNRZDü SU]\

pomocy toluenu (Mahendra i Alvarez-Cohen, 2006) [23] 3RQLHZDĪ ZH ZF]HĞQLHj-V]\FKEDGDQLDFKVWZLHUG]RQRĪHPseudomonas sp. E-93486 oraz Pseudomonas putida mt-QLHSRWUDILąZ\NRU]\VW\ZDüWROXHQXMDNRĨUyGáDZĊJODGRGDQRWROXHQW\ONRGR

hodowli szczepu KB2.

Posiew szczepu KB2 ze VNRVXZ\NRQDQRZSUREyZNDFK]DZLHUDMąF\FKEXOLRQRd-Ī\ZF]\SRĪ\ZNĊPLQHUDOQą]JOXNR]ą lub SRĪ\ZNĊPLQHUDOQąz toluenem+RGRZOĊ

QD EXOLRQLH RGĪ\ZF]\P SR  h przeniesiono do SUREyZNL ] SRĪ\ZNą PLQHUDOQą

i GRGDQRWROXHQ3RGREQHSRVWĊSRZDQLH]DVWRVRZDQRZSU]\SDGNXNRPyUHNKRGRZa-Q\FK]JOXNR]ąMDNRVXEVWUDWHPRGĪ\ZF]\P'RGDQLHEXOLRQXLJOXNR]\PLDáRXPRĪ

OLZLüQDPQRĪHQLHNRPyUHNV]F]HSX.%DGRGDWNRZRZ\ND]DüF]\URG]DMVXEVWUDWX

RGĪ\ZF]HJR PRĪH ZSá\Qąü QD SRWHQFMDOQą GHJUDGDFMĊ WROXHQX 1D SRGVWDZLH SU]e-SURZDG]RQ\FKSRPLDUyZVWZLHUG]RQRĪHWROXHQQLHPRĪHE\üVXEVWUDWHPRGĪ\ZF]\P

GODNRPyUHN.%SRQLHZDĪV]F]HSWHQQLHZ\ND]XMHZ]URVWXMHĞOLWROXHQ]RVWDQLH

dodany jaNRMHG\QHĨUyGáRZĊJOD (rys. 6 i 7). 1DMVáDEV]\Z]URVW uzyskano dla zawiesi-ny bakterii SLHUZRWQLHKRGRZDQHMZSUREyZNDFK]EXOLRQHP. Po przelaniu kultury do SUREyZHN]SRĪ\ZNąPLQHUDOQą i dodaniu toluenu SRF]ąWNRZo obserwowano wzrost biomasy. Natomiast trzeciej dawki toluenu NRPyUNL.% QLHSRWUDILá\]GHPLQHUDOi-]RZDüSU]H]GQL Szczep KB2 przeniesiony ]HVNRVX GRSRĪ\ZNL PLQHUDOQHMGR

NWyUHMGRGDQRWROXHQZ\ND]Dá\SHZLHQZ]URVWQLHVWHW\E\áRQVáDE\L bardzo wolny (rys.7A). 1DSRGVWDZLHX]\VNDQ\FKZ\QLNyZPRĪQDVWZLHUG]LüĪHNRPyUNLV]F]HSX

0

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

80 (6=&=<5%$i inni

.%QLHURVQąZREHFQRĞFLWROXHQXQDW\OHHIHNW\ZQLHDE\PRĪOLZHE\áRLFKZ\No-rzystanie w dalszych badaniach.

Rys. 6. Wzrost NRPyUHNV]F]HSX KB2 ZREHFQRĞFL toluenu MDNRĨUyGáDZĊJOD. BakteriH]HVNRVX]RVWDá\

przeniesione do SUREyZki ]SRĪ\ZNąPLQHUDOQąLGRGDQo toluen

Fig. 6. The growth of KB2 cells with toluene as the only carbon source. The cells from agar plates were moved to the mineral medium and toluene was added

Rys. 7. Wzrost NRPyUHNV]F]HSX KB2 ZREHFQRĞFL toluenu MDNRĨUyGáDZĊJOD. BakteriH]HVNRVX]RVWDá\

przeniesione do SUREyZki z EXOLRQHPRGĪ\ZF]\P (A) lub do SUREyZki z SRĪ\ZNąPLQHUDOQą]JOXNR]ą (B). Po 24 h hodowle przeniesiono do nowej SUREyZki ]SRĪ\ZNąPLQHUDOQąLGRGDQo toluen Fig. 7. The growth of KB2 cells with toluene as the only carbon source. The cells from agar plates were transferred to the nutritional broth (A) or to the mineral medium with glucose (B). After 24 h the culture

was transferred to the mineral medium and 1,4-dioksan was added every 24 h

.ROHMQ\PHWDSHPSUDFE\áRVSUDZG]HQLHczy szczep Stenotrophomonas maltophi-lia KB2 przystosowany ZF]HĞQLHM GR GHJUDGDFML IHQolu, posiada ]GROQRĞü UR]NáDGX

1,4-

Czas hodowli (doba)

0

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

GODWHJRSRGMĊWRSUDFHSR]ZDODMąFHVWZLHUG]Lü F]\ PRĪOLZH MHVW Z\NRU]\VWDQLH NRPyUHN GHJUDGXMąF\FK IHQRO GR UR]NáDGX 

1DSRGVWDZLHX]\VNDQ\FKZ\QLNyZVWZLHUG]RQRĪHZF]HĞQLHMV]HSU]\VW

GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD SU]HSURZDG]RQR SUyE\ NRPHWDEROLF]QHJR

UR]NáDGXWHVWRZDQHJR]ZLą]NXZREHFQRĞFLIHQROX

ND]Dá\Z]URVWDEVRUEDQFMLDFR]DW\PLG]LH OLF]E\NRPyUHN.%JG\GRKRGRZOLGRGDZDQ\E\á ]DUyZQRIHQROMDNL

]QDF]ąFR]ZLĊNV]RQRGDZNĊIHQROXU\V GRLORĞFLGRGDZDQHMVWDQGDUWRZRZF]DVLHKRGRZOLEDGDQHJRV]F]HSX]IHQROHP

MDNR MHG\Q\P ĨUyGáHP ZĊJOD ]  —O GR  —O IHQROX -HGQRF]HĞQLH DQDOL]\

SR]ZROLá\VWZLHUG]LüĪHRLOHIHQROE\á GHJUDGRZDQ\]XSHáQLH

NDĪGHMNROHMQHM ZDá ZKRGRZOLDMHJRVWĊĪHQLHZ]

VWDáRZUD]]NROHMQRZSURZDG]DQ\PLGDZNDPL

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 81

.%QLHURVQąZREHFQRĞFLWROXHQXQDW\OHHIHNW\ZQLHDE\PRĪOLZHE\áRLFKZ\N

NRPyUHNV]F]HSX ZREHFQRĞFL MDNRĨUyGáDZĊJOD H]HVNRVX]RVWDá\

SUREyZ ]SRĪ\ZNąPLQHUDOQąLGRGDQ

NRPyUHNV]F]HSX ZREHFQRĞFL MDNRĨUyGáDZĊJOD H]HVNRVX]RVWDá\

SUREyZ EXOLRQHPRGĪ\ZF]\P SUREyZ SRĪ\ZNąPLQHUDOQą]JOXNR]ą SUREyZ ]SRĪ\ZNąPLQHUDOQąLGRGDQ

.ROHMQ\PHWDSHPSUDFE\áRVSUDZG]HQLH

ZF]HĞQLHM GR GHJUDGDFML IHQ ]GROQRĞü UR]NáDGX

GLRNVDQX.OXF]RZ\PHQ]\PHPV]ODNXUR]NáDGXIHQROXSRGREQLHMDNZSU]\SD

Czas hodowli (doba)

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

ku 1,4-dioksanu jest monooksygenza, GODWHJRSRGMĊWRSUDFHSR]ZDODMąFHVWZLHUG]Lü

F]\ PRĪOLZH MHVW Z\NRU]\VWDQLH NRPyUHN GHJUDGXMąF\FK IHQRO GR UR]NáDGX -dioksanu. 1DSRGVWDZLHX]\VNDQ\FKZ\QLNyZVWZLHUG]RQRĪHZF]HĞQLHMV]HSU]\VWo-sowanie NRPyUHNV]F]HSXStenotrophomonas maltophilia KB2 do degradacji fenolu, nie XPRĪOLZLDW\PNRPyUNRPZ]URVWX]Z\NRU]\VWDQLHP-dioksanu jako jedynego ĨUyGáDZĊJODU\V).

Rys. 8. Wzrost NRPyUHNV]F]HSXKB2 pre-inkubowanego z fenolem. :REHFQRĞFL 1,4-dioksanu jako jedynego ĨUyGáa ZĊJOD

Fig. 8. The growth of KB2 cells pre-incubated with phenol. 1,4-dioxane was a the only carbon source

3RZVWDáRZLHOHSUDFGRW\F]ąF\FKUR]NáDGX-dioksanu (tab. NWyUHGRZRG]ą

ĪH]ZLą]HNWHQPRĪHE\üUR]NáDGDQ\SU]H]EDNWHULHDOERMDNRVDPRG]LHOQ\VXEVWUDW

albo w XNáDG]LHNRPHWDEROLF]Q\P]LQQ\PL]ZLą]NDPLGODWHJRWHĪJG\ZF]HĞQLHMV]H

EDGDQLDZ\ND]Dá\ĪHStenotrophomonas maltophilia .%QLHPD]GROQRĞFLGRZ\No-rzystania 1,4-GLRNVDQX MDNR ĨUyGáD ZĊJOD SU]HSURZDG]RQR SUyE\ NRPHWDEROLF]QHJR

UR]NáDGXWHVWRZDQHJR]ZLą]NXZREHFQRĞFLIHQROX

Testy przeprowadzone w kolbach wyND]Dá\Z]URVWDEVRUEDQFMLDFR]DW\PLG]LH

OLF]E\NRPyUHN.%JG\GRKRGRZOLGRGDZDQ\E\á ]DUyZQRIHQROMDNL-dioksan.

Po pierwszym tygodniu hodowli (rys. 9A]QDF]ąFR]ZLĊNV]RQRGDZNĊIHQROXU\V

9BGRLORĞFLGRGDZDQHMVWDQGDUWRZRZF]DVLHKRGRZOLEDGDQHJRV]F]HSX]IHQROHP

MDNR MHG\Q\P ĨUyGáHP ZĊJOD ]  —O GR  —O IHQROX -HGQRF]HĞQLH DQDOL]\

chromatograficzne SR]ZROLá\VWZLHUG]LüĪHRLOHIHQROE\á GHJUDGRZDQ\]XSHáQLH po NDĪGHMNROHMQHMdawce, o tyle 1,4-dioksan pozostaZDá ZKRGRZOLDMHJRVWĊĪHQLHZ]ra-VWDáRZUD]]NROHMQRZSURZDG]DQ\PLGDZNDPL

0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25

0 5 10 15 20

Absorbancja

Czas hodowli (doba)

82 (6=&=<5%$i inni

Rys. 9. Wzrost komórek szczepu KB2 pre-inkubowanego z fenolem. Fenol i 1,4-dioksan VWDQRZLá\ĨUyGáo ZĊJOD$LSRSLHUZV]\PSDVDĪX%

Fig. 9. The growth of KB2 cells pre-incubated with phenol. 1,4-dioxane and phenol was added every 24 h to the culture (A) and after first passage (B).

3U]HSURZDG]RQRZVWĊSQHEDGDQLDZSá\ZX-GLRNVDQXQDUR]NáDGIHQROXZUHDk-torze okresowym SU]H]UyĪQHV]F]HS\EDNWHULL%DGDQLDSU]HSURZDG]RQRGODUyĪQ\FK

VWĊĪHĔSRF]ąWNRZ\FKfenolu i 1,4-GLRNVDQX'ODNDĪGHJRHNVSHU\PHQWX, na podstawie krzywej wzrostu biomasy, Z\]QDF]RQRZáDĞFLZąV]\ENRĞüZ]URVWX]QDFK\OHQLDSUo-VWHM QD SyáORJDU\WPLF]Q\P Z\NUHVLH ]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLDELRPDV\ RG F]DVXKRGRZOL

$QDOL]RZDQD E\áD ID]D Z]URVWX Z\NáDGQLF]HJR SRGF]DV NWyUHM ZáDĞFLZD V]\ENRĞü

Z]URVWXPLNURRUJDQL]PyZMHVWVWDáDU\V10, 12, 14, 16).

6WZLHUG]RQR ĪH Z PRPHQFLHFDáNRZLWHJR Z\F]HUSDQLDIHQROX Z UHDNWRU]H koĔ

F]\áDVLĊUyZQLHĪID]DZ]URVWX3RGREQH]MDZLVNRPRĪQDE\áR]DREVHUZRZDüZSU]y-SDGNXJG\IHQROE\áMHG\Q\PĨUyGáHPZĊJODZKRGRZOL3RZ\F]HUSDQLXVLĊIHQROX

REVHUZRZDQRSRMDZLHQLHVLĊID]\]DPLHUDQLDF]\OLWDNLHJRRNUHVXZKRGRZOLNLHG\

F]ĊĞüSRSXODFMLVWDMHVLĊSRNDUPHPGODLQQ\FKNRPyUHN. Dla przeprowadzanych po-PLDUyZZ\]QDF]RQRZVSyáF]\QQLN]DPLHUDQLDNRPyUHNkd) (rys. 10, 12, 14, 16) opi-VDQHJR]DOHĪQRĞFLą

X dt k

dX

 d

Na rysunkach 11, 13, 15 i 17 SU]HGVWDZLRQR]DPLDQ\VWĊĪHĔVXEVWUDWyZRUD]ELo-masy w F]DVLH WUZDQLD HNVSHU\PHQWyZ We wszystkich przeprowadzanych ekspery-PHQWDFK IHQRO XOHJDá FDáNRZLWHM GHJUDGDFML SRGF]DV JG\ -GLRNVDQ SR]RVWDZDá

w mieszaninie reakcyjnej.

0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8

0 2 4 6

Abosrbancja

Czas hodowli (doba) A

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2

0 2 4 6 8

Absorbancja

Czas hodowli (doba) B

:\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZH JÂP JÂP

ZVSyáF]\QQLND]DPLHUDQLD

JÂP JÂP

VWĊĪHĔIHQROXL GLRNVDQX6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZHIHQRO JÂP JÂP

5ð  5ð 

6WĊĪHQLHJÂP

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 83 VWHM QD SyáORJDU\WPLF]Q\P Z\NUHVLH ]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLDELRPDV\ RG F]DVXKRGRZOL

$QDOL]RZDQD E\áD ID]D Z]URVWX Z\NáDGQLF]HJR SRGF]DV NWyUHM ZáDĞFLZD V]\ENRĞü

Z]URVWXPLNURRUJDQL]PyZMHVWVWDáDU\V

6WZLHUG]RQR ĪH Z PRPHQFLHFDáNRZLWHJR Z\F]HUSDQLDIHQROX Z UHDNWRU]H Ĕ

F]\áDVLĊUyZQLHĪID]DZ]URVWX3RGREQH]MDZLVNRPRĪQDE\áR]DREVHUZRZDüZSU] F]DVLH WUZDQLD HNVSHU\PHQWyZ

PHQWDFK IHQRO XOHJDá FDáNRZLWHM GHJUDGDFML SRGF]DV JG\  GLRNVDQ SR]RVWDZDá

Czas hodowli (doba) A

Czas hodowli (doba) B

Rys. 10. :\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

biomasy od czasu (VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 JÂP^-3, 1,4-dioksan - S₀ JÂP^-3) oraz ZVSyáF]\QQLND]DPLHUDQLD

Fig. 10. Estimation of specific growth rate from the semi-logarithmic plot of biomass concentration versus time (for phenol S₀ JÂP^-3, 1,4-dioxane S₀ JÂP^-3). Evaluation of decay coefficient

Rys. 11. Zmiany VWĊĪHĔIHQROXL-GLRNVDQX6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZHIHQRO- S0 JÂP^-3 i 1,4-dioksan - S₀ = 100 JÂP^-3

Fig. 11. The variation of biomass, phenol and 1,4-dioxane concentration versus time y = 0,3898x + 3,7561

fenol 1,4-dioksan absorbancja

84 (6=&=<5%$i inni

Rys. 12. :\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

biomasy od czasu (VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 JÂP^-3, 1,4-dioksan - S₀ = 20 JÂP^-3) RUD]ZVSyá

czynnika zamierania

Fig. 12. Estimation of specific growth rate from the semi-logarithmic plot of biomass concentration versus time (for phenol S₀ JÂP^-3, 1,4-dioxane S₀ = 20 JÂP^-3). Evaluation of decay coefficient

Rys. 13. Zmiany VWĊĪHĔIHQROXL-dioksanu. 6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 JÂP^-3 i 1,4-dioksan - S₀ = 20 JÂP^-3

Fig. 13. The variation of biomass, phenol and 1,4-dioxane concentration versus time y = 0,4055x + 3,8546

5ð 

y = -0,0589x + 5,045 5ð 

4 4,1 4,2 4,3 4,4 4,5 4,6 4,7 4,8 4,9 5

0 10 20 30

Ln biomasy

Czas, h

0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

Absorbancja

6WĊĪHQLHJÂP-3

Czas, h

fenol 1,4-dioksan absorbancja

:\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZH JÂP JÂP RUD]ZVSyá

JÂP JÂP

VWĊĪHĔIHQROXL GLRNVDQX6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZH JÂP JÂP

5ð  5ð 

6WĊĪHQLHJÂP

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 85

:\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZH JÂP JÂP RUD]ZVSyá

JÂP JÂP

VWĊĪHĔIHQROXL 6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZH JÂP dioksan JÂP

y = 0,4055x + 3,8546 5ð 

0,0589x + 5,045 5ð 

fenol dioksan absorbancja

Rys. 14. :\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

biomasy od czasu (VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 JÂP^-3, 1,4-dioksan - S₀ = 10 JÂP^-3) RUD]ZVSyá

czynnika zamierania

Fig. 14. Estimation of specific growth rate from the semi-logarithmic plot of biomass concentration versus time (for phenol S₀ JÂP^-3, 1,4-dioxane S₀ = 10 JÂP^-3). Evaluation of decay coefficient

Rys. 15. Zmiany VWĊĪHĔIHQROXL-GLRNVDQX6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZH fenol - S0 JÂP^-3 i 1,4-dioksan - S₀ = 10 JÂP^-3

Fig. 15. The variation of biomass, phenol and 1,4-dioxane concentration versus time y = 0,3459x + 3,7813

fenol 1,4-dioksan absorbancja

86 (6=&=<5%$i inni

Rys. 16. :\]QDF]HQLHZáDĞFLZHMV]\ENRĞFLZ]URVWX]SyáORJDU\WPLF]QHJRZ\NUHVX]DOHĪQRĞFLVWĊĪHQLD

biomasy od czasu (VWĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 = 2JÂP^-3, 1,4-dioksan - S₀ = 10 JÂP^-3) RUD]ZVSyá

czynnika zamierania

Fig. 16. Estimation of specific growth rate from the semi-logarithmic plot of biomass concentration versus time (for phenol S₀ = 2JÂP^-3, 1,4-dioxane S₀ = 10JÂP^-3). Evaluation of decay coefficient

Rys. 17. Zmiany VWĊĪHĔIHQROXL-GLRNVDQX6WĊĪHQLDSRF]ąWNRZHfenol - S0 = 2JÂP^-3 i 1,4-dioksan - S₀ = 10 JÂP^-3

Fig. 17. The variation of biomass, phenol and 1,4-dioxane concentration versus time y = 0,358x + 3,7481

fenol 1,4-dioksan absorbancja

-DN PRĪQD ]DREVHUZRZDü QD SRGVWDZLH ZVWĊSQ\FK EDGDĔ ZáDĞFLZD V]\ENRĞü

ZVSyáF]\QQLN]DPLHUDQLDQLHVą]DOHĪQH SRF]ąWNRZHJRVWĊĪHQLD

\QLNLWHZ\PDJDMąGDOV]HMZHU\ILNDFML

:áDĞFLZDV]\ENRĞüUHDNFMLGODUyĪQ\FKSRF]ąWNRZ\FKVWĊĪHĔVXEVWUDWyZ

JÂP JÂP —

:áDĞFLZDV]\ENRĞüZ]URVWXPLNURRUJDQL]PyZZ REHFQRĞFL

E\áD QLĪV]D QLĪ JG\ Z Z\VWĊSRZDáW\ONR IHQRO GOD NWyUHJR — Z\QRVLáR JÂP DWRPLDVWZVSyáF]\QQLN]DPLHUDQLDE\á

QLHZLĊNV]\GODNRPyUHNKRGRZDQ\FKZREHFQRĞFL MDNRMHG\QHJRĨUyGáD

ZĊJOD Lá

3U]\F]\QEUDNXZ]URVWXEDNWHULLZREHFQRĞFL GLRNVDQXPRĪHE\üZLHOH1D F]ĊĞFLHM Z\PLHQLDQ\PL Z OLWHUDWXU]H E\á\ EUDN RGSRZLHGQLFK HQ]\PyZ V]ODNX UR NáDGX  GLRNVDQX OXE EUDN ]GROQRĞFL HIHNW\ZQHJR SU]HWZDU]DQLD PHWDEROLWyZ

SRZVWDMąF\FKZ

SRĞUHGQLZ\PLHQLDQ\ \á +($$NWyU\DNXPX RZDá

VLĊ Z NRPyUNDFK XQLHPRĪOLZLDMąF LFK Z]URVW 9DLQEHUJ L ZVSyáSUDFRZQLF\

V]\ENRĞFLąSRF]ąWNRZąV]DFRZDQąQD PJGLRNVDQXÂK ÂJ766 2ND]DáRVLĊMH QDNĪHV]F]HSWHQQLHPLDá ]GROQRĞFLZ]URVWXZREHFQRĞFL

E\áR QDMSUDZGRSRGREQLHM SRMDZLHQLHP VLĊ Z NRPyUNDFK WRNV\F]QHJR

+($$NWyU\QLHE\á WUDQVIRUPRZDQ\ZNROHMQHSURGXNW\SRĞUHGQ

yZ GHJUDGXMąF\ GLRNVDQ E\á NWyUHJRSRWZLHUG]RQRREHFQRĞüPRQ V\JHQD]\ 0DNV\PDOQD ZáDĞFLZD V]\ENRĞü Z]URVWX Z ]DOHĪQRĞFL RG DXWRUD SUDF\

Z\QRVLáDG]LHĔ OXEG]LHĔ :ĞUyGSURGXNWyZUR]NáDGX

WZLHUG]RQR REHFQRĞü E\á RQ SU]HNV]WDáFDQ\ Z QDVWĊSQH SURGXNW\

SRĞUHGQLHLQLHDNXPXORZDá VLĊZNRPyUNDFK

3U]HSURZDG]RQHWHVW\PDMąFHQDFHOXGREUDQLHPLNURRUJDQL]PyZH

JUDGXMąF\FK  GLRNVDQ SR]ZROLá\ VWZLHUG]Lü ĪH EDGDQH GR WHM SRU\ V]F]HS\ QLH

PDMą]GROQRĞFLZ]URVWX] GLRNVDQHPMDNRĨUyGáHPZĊJODFRMHVWZDUXQNLHPQL ]EĊGQ\PGRVWZRU]HQLDPRGHOXNLQHW\F]QHJRUHDNFML2EHFQLHSURZDG]RQHVąHNVS

W\ NWyUH SR]ZROą RNUHĞOLü F]\ V]F]HS\

Vą]GROQHGRZ\NRU]\VWDQLDWHWUDK\GURIXUDQX7+)MDNR

ĨUyGáDZĊJODLF]\PRĪOLZ\EĊG]LHUR]NáDG GLRNVDQXZXNáDG]LHNRPHWDEROLF]Q\P

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 87

3URMHNWRZDQLHXNáDGXNRPHWDEROLF]QHJR 87

W dokumencie ,QVW\WXW,QĪ\QLHULL&KHPLF]QHM (Stron 77-93)