WPŁYW TNFα NA POZIOM ADHEZJI I INWAZJI
SZCZEPÓW
ESCHERICHIA COLI W PRZEBIEGU CHOROBY
LEŚNIOWSKIEGOCROHNA
THE EFFECT OF TNFα ON THE LEVEL OF ADHESION AND INVASION OF
ESCHERICHIA COLI STRAINS
IN THE COURSE OF CROHN’S DISEASE
Katedra i Zakład Mikrobiologii
Uniwersytetu Medycznego we Wrocławiu
} ANNA DUDAMADEJ
Katedra i Zakład Mikrobiologii, Uniwersytet Medyczny we Wrocławiu, ul. Chałubińskiego 4, 50-368 Wrocław, e-mail: anna.duda-madej@umed.wroc.pl Wpłynęło: 30.05.2018
Zaakceptowano: 15.06.2018 DOI: dx.doi.org/10.15374/FZ2018021
STRESZCZENIE: Badania przeprowadzone w ostatnich latach wykazały rolę patogennych adhe-rentno-inwazyjnych szczepów Escherichia coli (AIEC) w indukcji sekrecji TNF-α oraz ich zdolność adhezji do cząstek powierzchniowych CEACAM6 na komórkach nabłonka jelita człowieka. Wzrost sekrecji TNF-α indukuje z kolei zwiększoną ekspresję cząstek adhezyjnych CEACAM6, co nasila ad-hezję pałeczek AIEC. Bardzo ważne jest wyjaśnienie roli w procesie adhezji do nabłonka jelita czło-wieka fimbrii typu 1, dzięki którym szczepy AIEC wchodzą w interakcję z cząstkami CEACAM6. SŁOWA KLUCZOWE: adhezja, AIEC, inwazja, receptory powierzchniowe CEACAM6, TNF-α
ABSTRACT: Recent studies have demonstrated the role of pathogenic Escherichia coli –
ad-herent-invasive strains (AIEC) in the induction of TNF-α secretion and their ability to adhere to CEACAM6 molecules on the surface of human intestinal epithelial cells. The increase of TNF-α production induces the expression of CEACAM6, which increases the adhesion of the AIEC bacteria. It is very important to clarify the role of type 1 fimbriae in the process of adhesion to the epithelium of the human intestinal cells, which is linked to the interaction between the AIEC and CEACAM6 molecules.
KEY WORDS: adhesion, AIEC, CEACAM6, invasion, TNF-α
WSTĘP
:EDGDQLDFKQLH]QDQHJRSDWRPHFKDQL]PXFKRURE\/H-ĞQLRZVNLHJR&URKQD FK/& Z\ND]DQR ĪH SU]\F]\Qą VWD-QX ]DSDOQHJR L XV]NRG]HQLD WNDQHN Vą ]DEXU]HQLD RGSR-ZLHG]L LPPXQRORJLF]QHM QD REHFQRĞü EDNWHULL MHOLWRZ\FK 8SDFMHQWyZ]FK/&VWZLHUG]RQRQDGHNVSUHVMĊJOLNRSURWH-LQRZ\FKUHFHSWRUyZSRZLHU]FKQLRZ\FKNRPyUHNQDEáRQND DQJ FDUFLQRHPEU\RQLF DQWLJHQUHODWHG FHOO DGKHVLRQ PR- OHFXOH±&($&$0 XF]HVWQLF]ąF\FKZZLą]DQLXDGKH-UHQWQRLQZD]\MQ\FKV]F]HSyZEscherichia
coli $,(& 3UR- FHVNRORQL]DFMLRGE\ZDVLĊ]XG]LDáHP¿PEULLW\SXNWy-UH Vą ]DUD]HP F]\QQLNDPL ZLUXOHQFML W\FK V]F]HSyZ >@ 2EHFQRĞüF]ąVWHNDGKH]\MQ\FK&($&$0QDSRZLHU]FK-QL NRPyUHN QDEáRQND MHOLWD XáDWZLD NRORQL]DFMĊ V]F]HSyZ $,(&DQDVWĊSQLHLFKLQZD]MĊGRNRPyUHNQDEáRQND'R-W\FKF]DV Z\ND]DQR ĪH DGKHUHQWQRLQZD]\MQH V]F]HS\
E.
coliPDMąQLH]Z\Náą]GROQRĞüQDPQDĪDQLDVLĊZPDNURID- JDFKEODV]NLSRGVWDZQHMEáRQ\ĞOX]RZHMMHOLWDNWyUHZRG-SRZLHG]L XZDOQLDMą GXĪH LORĞFL F]\QQLND PDUWZLF\ QRZR-WZRUX DQJWXPRUQHFURVLVIDFWRUĮ±71)Į >@:HIHNFLH
GRFKRG]LGRQDGHNVSUHVML&($&$0QDSRZLHU]FKQLQD-EáRQND FR XPRĪOLZLD GDOV]ą DGKH]MĊ V]F]HSyZ$,(& WR ]NROHLVNXWNXMHORNDOQ\PRZU]RG]HQLHPHQWHURF\WyZLSR-ZVWDZDQLHP PLNURRZU]RG]HĔ EáRQ\ ĞOX]RZHM MHOLWD SU]H- NV]WDáFDMąF\FKVLĊVWRSQLRZRZ]LDUQLQLDNL:LHOXQDXNRZ-FyZMHVW]GDQLDĪHZ]URVWSR]LRPX71)ĮMHVW]ZLą]DQ\ ]SU]HZOHNá\PL]DNDĪHQLDPLSU]HZRGXSRNDUPRZHJR1LH- NWyU]\XZDĪDMąĪHSRGZ\ĪV]RQ\SR]LRPF]\QQLNDPDUWZL- F\QRZRWZRUXPD]ZLą]HN]ZU]RG]LHMąF\P]DSDOHQLHPMH-OLWDJUXEHJRQDWRPLDVWQLHNRUHOXMH]XV]NRG]HQLDPLEáRQ\ ĞOX]RZHMMHOLWDZSU]HELHJXFK/&>@ :GRW\FKF]DVRZ\FKEDGDQLDFKZ\ND]DQRĪHSDWRJHQ-QHV]F]HS\E. coliQDOHĪąFHGRSDWRW\SXDGKHUHQWQRLQZD-]\MQHJRFHFKXMH]GROQRĞüZ]PRĪRQHMDGKH]MLLLQZD]MLGR NRPyUHNQDEáRQNDMHOLWDVW\PXORZDQ\FK71)Į:QLQLHM-V]HM SUDF\ RFHQLRQR ZSá\Z QDGHNVSUHVML F]ąVWHN DGKH]\M-Q\FK &($&$0 QD NRPyUNDFK QDEáRQND MHOLWD VW\PXOR-ZDQ\FK SU]H] F]\QQLN PDUWZLF\ QRZRWZRUX QD ]GROQRĞü DGKH]MLLLQZD]MLSDWRJHQQ\FKV]F]HSyZE. coli izolowanych
]SU]\SDGNyZQLHVZRLVW\FK]DSDOHĔMHOLW DQJLQÀDPPDWR-U\ERZHOGLVHDVH±,%' XG]LHFL
MATERIAŁY I METODY
POCHODZENIE SZCZEPÓW
'R EDGDĔ XĪ\WR Z]RUFRZHJR V]F]HSXEscherichia coli
$,(&/)L]RORZDQHJRRGGRURVáHJRSDFMHQWD]FKRUR-Eą /HĞQLRZVNLHJR&URKQD Z]RUFRZHJR QLHSDWRJHQQHJR V]F]HSXE. coli.RUD]GZyFKG]LNLFKV]F]HSyZE. coli
MHGQHJRL]RORZDQHJRRGG]LHFND]FK/& /& RUD]MHG-QHJRL]RORZDQHJRRGG]LHFND]ZU]RG]LHMąF\P]DSDOHQLHP MHOLWDJUXEHJR 8&
WYKRYWANIE FIMBRII MS/MR TYPU 1
=GROQRĞüSURGXNFML¿PEULLPDQQR]RZUDĪOLZ\FKLPDQ-QR]RRSRUQ\FK W\SX R]QDF]DQR X EDGDQ\FK V]F]HSyZ SRGGDQ\FK WU]HP JRG]LQQ\P SDVDĪRP Z SRGáRĪX WU\S-WR]RZRVRMRZ\P 8]\VNDQ\ Z WHQ VSRVyE RVDG EDNWHU\M-Q\ UR]SXV]F]DQR Z VROL ¿]MRORJLF]QHM L PLHV]DQR RGSR-ZLHGQLR]UR]WZRUHPGURĪGĪ\SLHNDUQLF]\FKRUD] 'PDQQR]ą=DZLHVLQĊPLHV]DQRSU]H]±PLQXW\UXFKHP NXOLVW\P:\QLNDJOXW\QDFMLRGF]\W\ZDQRSR±PLQXWDFK
TEST ADHEZJI
=GROQRĞü DGKH]MLin vitro EDGDQ\FK V]F]HSyZ E. coli RNUHĞODQR LORĞFLRZR QD SRGVWDZLH WHVWX DGKH]ML GR ]UyĪ-QLFRZDQHM ±GQLRZHM OLQLL &DFR OXG]NLH NRPyU-NL QDEáRQND MHOLWD JUXEHJR >@ /LQLH NRPyUNRZH KRGR-ZDQRZSRGáRĪX0(0]SáRGRZąVXURZLFąE\GOĊFą
] GRGDWNLHP UR]WZRUX DQW\ELRW\NyZ RUD] DPLQRNZDVyZ HQGRJHQQ\FKSLURJURQLDQLXVRGRZHJR/JOXWDPLQXL+(-3(63R]DNDĪHQLXNRPyUHNQDEáRQNDEDGDQ\PLV]F]HSDPL E. coli 02, SRGGDQRMHOL]LHDX]\VNDQHOL]DW\±SR UR]FLHĔF]HQLXZSRVWĊSLHJHRPHWU\F]Q\P±Z\VLHZDQRQD SRGáRĪH0DF&RQNH\¶D/LF]EĊEDNWHULLSU]\OHJDMąF\FKRE-OLF]DQRQDSRGVWDZLHLORĞFLZ\URVá\FKNRORQLLLZ\MĞFLRZHM OLF]E\ EDNWHULL XĪ\W\FK GR ]DNDĪHQLD XVWDORQHM OLF]E\ NR-PyUHNQDEáRQNDMHOLWD=GROQRĞüDGKH]MLin vitroEDGDQ\FK
V]F]HSyZEscherichia
coliRNUHĞODQRMHGQRF]HĞQLHZREHF-QRĞFLOXEEUDNX'PDQQR]\5yZQRF]HĞQLHWHVWDGKH]ML Z\NRQDQRQDNRPyUNDFKXSU]HGQLRVW\PXORZDQ\FKSU]H] JRG]LQ\71)ĮZVWĊĪHQLXQJPO
TEST INWAZJI
=GROQRĞüLQZD]MLin vitroEDGDQ\FKV]F]HSyZEscherichiacoliRNUHĞODQRLORĞFLRZRQDSRGVWDZLHWHVWXLQZD]MLGRNR-PyUHN ]UyĪQLFRZDQHM ±GQLRZHM OLQLL &DFR ZHGáXJ ]PRG\¿NRZDQHMPHWRG\RSLVDQHMSU]H])DONRZLZVS>@ .RPyUNL QDEáRQND ]DNDĪDQR EDGDQ\PL V]F]HSDPLE. coli
2' îFIXPO ±WDNDE\QDMHGQąNRPyUNĊQDEáRQND SU]\SDGDáRNRPyUHNEDNWHU\MQ\FK 02, 3RJR-G]LQQHMLQNXEDFMLZDWPRVIHU]HZ]ERJDFRQHM&22 EDN-WHULH ]ZLą]DQH ] SRZLHU]FKQLą NRPyUHN QDEáRQND XVXQLĊ-WR SRSU]H] LQNXEDFMĊ Z SRGáRĪX ]DZLHUDMąF\P JHQWDP\F\-QĊ &N JPO %DNWHULHXZROQLRQH]NRPyUHNQDEáRQND SRSU]H]OL]ĊUR]FLHĔF]DQRZSRVWĊSLHJHRPHWU\F]Q\PLZ\-VLHZDQR QD SRGáRĪH 0DF&RQNH\¶D -HGQRF]HĞQLH ]GROQRĞü EDGDQ\FK V]F]HSyZ GR LQZD]ML VSUDZG]DQR QD NRPyUNDFK ]DVW\PXORZDQ\FK71)Į JRG]LQ\&N QJPO Szczep E. coli Indeks fagocytarny (%)±SD t=0 Indeks przeżywalności (%)±SD t=24 LC15/1 0,825±0,19 0,302±0,24 UC32/2 0,594±0,22 0,088±0,06 LF82 0,500±0,19 1,013±0,00 K12 0,199±0,02 0,005±0,002
Szczep E. coli Poziom adhezji (cfu/ml×106)±SD
Bez D-mannozy Z D-mannozą
Bez TNF-α Z TNF-α Bez TNF-α Z TNF-α
LC15/1 2,93±1,22 5,24±0,51 2,90±1,33 9,18±0,95
UC32/2 4,94±1,78 22,30±4,10 3,08±2,47 5,22±1,66
LF82 111,00±66,80 228,00±87,00 7,12±1,31 16,80±4,46
K12 13,40±1,63 13,20±1,37 2,22±0,17 2,02±0,58
Ryc. 1. A. Makrofagi (kontrola negatywna). B. Szczep degradowany wewnątrz komórki żernej. C. Szczep E. coli LF82 wykazujący zdolność przeżycia i namnażania się wewnątrz komórki fagocytarnej.
Tabela 1. Indeks fagocytarny i indeks przeżywalności. Tabela 2. Poziom adhezji.
ZDOLNOŚĆ PRZEŻYWANIA WEWNĄTRZ
MAKROFAGÓW
7HVW IDJRF\WR]\ SU]HSURZDG]RQR QD FLąJáHM OLQLL OXG]-NLFK PRQRF\WyZ 7+3 î NRPyUHNPO Z 530, Z]ERJDFRQ\P VXURZLFą E\GOĊFą /JOXWDPLQą P0 RUD] UR]WZRUHP DQW\ELRW\NyZ 1DPQRĪRQH PRQR-F\W\UyĪQLFRZDQRSU]H]JRG]LQZPDNURIDJL]DSRPRFą P030$ DQJSKRUEROP\ULVWDWHDFHWDWH 0DNUR-IDJL]DNDĪDQREDGDQ\PLV]F]HSDPLE. coliZVWRVXQNX
02, LLQNXERZDQRSU]H]PLQXW W DQDVWĊSQLH SU]H]JRG]LQ\ SU]HĪ\ZDQLH .ROHMQRNRPyUNLSRGGDQR OL]LH ]D SRPRFą UR]WZRUX7ULWRQX ; 8]\VNDQH OL-]DW\UR]FLHĔF]DQRZSRVWĊSLHJHRPHWU\F]Q\PLZ\VLHZDQR QDSRGáRĪH0DF&RQNH\¶D1DSRGVWDZLHX]\VNDQ\FKZ\QL-NyZGODEDGDQ\FKV]F]HSyZLRNUHĞORQ\FKF]DVyZREOLF]DQR LQGHNVIDJRF\WDUQ\F]\OLVWRVXQHNEDNWHULLVIDJRF\WRZDQ\FK SU]H]PDNURIDJLGRZ\MĞFLRZHMOLF]E\EDNWHULLXZ]JOĊGQLD-MąF\OLF]EĊPDNURIDJyZXĪ\W\FKZGRĞZLDGF]HQLX
OZNACZANIE CZĄSTEK ADHEZYJNYCH CEACAM6
METODĄ CYTOMETRII PRZEPŁYWOWEJ
(NVSUHVMĊ F]ąVWHN DGKH]\MQ\FK &($&$0 RFHQLDQR QDSRZLHU]FKQLNRPyUHNQDEáRQNDMHOLWDJUXEHJR &DFR ZHGáXJ]PRG\¿NRZDQHMPHWRG\,HWDLZVS>@3RWU]\JR- G]LQQHMLQNXEDFMLEDGDQ\FKV]F]HSyZ]NRPyUNDPLQDEáRQ-ND NRPyUNL RGHUZDQR ] SRGáRĪD SU]HP\WR ]LPQ\P 3%6 ]GRGDWNLHP%6$LSRGGDQRUHDNFML]PRQRNORQDOQ\-PL SU]HFLZFLDáD]GRGDWNLHP%6$LSRGGDQRUHDNFML]PRQRNORQDOQ\-PL DQW\&($&$0 ]QDNRZDQ\]GRGDWNLHP%6$LSRGGDQRUHDNFML]PRQRNORQDOQ\-PL DOOR¿-NRF\MDQLQą ,QNXERZDQR SU]H] ± PLQXW D QDVWĊSQLH WU]\NURWQLHSU]HP\WRUR]WZRUHP3%6]%6$3R]LRP HNVSUHVML F]ąVWHN &($&$0 RFHQLDQR QD SRGVWDZLH LQ-WHQV\ZQRĞFL V\JQDáX EDUZQLND ÀXRU\]XMąFHJR VNRQLXJR-ZDQHJR ] SU]HFLZFLDáHP DQW\&($&$0 RGF]\W\ZDQH- JRZF\WRPHWU]HSU]HSá\ZRZ\P>@7RVDPRGRĞZLDGF]H-QLH SRZWyU]RQR SR VW\PXODFML NRPyUHN QDEáRQND 71)Į JRG]LQ\ &N QJPO
WYNIKI
:ĞUyGEDGDQ\FKV]F]HSyZEscherichia coli trzy
wykaza-á\HNVSUHVMĊ¿PEULLW\SXQDVZRMHMSRZLHU]FKQLV]F]HS\ /&RUD]/)±¿PEULLPDQQR]RRSRUQ\FK DJOXW\QD- FMDZREHFQRĞFL'PDQQR]\ QDWRPLDVWV]F]HS.±PDQ-QR]RZUDĪOLZ\FK DJOXW\QDFMDZQLHREHFQRĞFL'PDQQR]\ 6]F]HS 8& QLH Z\ND]Dá ]GROQRĞFL DJUHJDFML NRPyUHN GURĪGĪ\SLHNDUQLF]\FK]DUyZQRZREHFQRĞFLMDNLQLHREHF-QRĞFL'PDQQR]\ 3U]HSURZDG]RQ\WHVWIDJRF\WR]\SRND]DáĪHEDGDQHV]F]H-S\E. coliQLHZ\ND]Dá\]GROQRĞFLSU]HĪ\ZDQLDZPDNURID- JDFK%\á\RQHGHJUDGRZDQHZHZQąWU]NRPyUHNIDJRF\WDU-Q\FK±ZSU]HFLZLHĔVWZLHGRV]F]HSXNRQWUROQHJR/)GOD NWyUHJR OLF]ED ZHZQąWU]NRPyUNRZ\FK EDNWHULL Z]URVáD SR JRG]LQDFKLQNXEDFML 7DEHOD FRZVND]DáRQDQDPQDĪD-QLHVLĊWHJRV]F]HSXZHZQąWU]NRPyUNLĪHUQHM 5\F
: WHĞFLH DGKH]ML ]DREVHUZRZDQR ĪH EDGDQH V]F]HS\
Escherichia coliZ\ND]Dá\Z\ĪV]\VWRSLHĔDGKH]MLGRNRPyUHN
QDEáRQND MHOLWD JUXEHJR XSU]HGQLR VW\PXORZDQ\FK 71)Į 6W\PXODFMD F]\QQLNLHP PDUWZLF\ QRZRWZRUX QLH ZSá\ZD-áDMHGQDNQDSR]LRPDGKH]MLQLHSDWRJHQQHJRV]F]HSXE. coli .3RQDGWRZREHFQRĞFL'PDQQR]\]DREVHUZRZDQRRE-QLĪHQLH VLĊ Z QLHNWyU\FK SU]\SDGNDFK ]QDF]QH Z LQQ\FK 3,2E+08 2,7E+08 2,2E+08 1,7E+08 1,2E+08 7,0E+07 2,0E+07 LC15/1 UC32/2 LF82 K12
TNF-α
A
dhezja (cfu/ml)
PQLHM]QDF]ąFH SR]LRPXDGKH]MLEDGDQ\FKV]F]HSyZ 7DEH-OD5\FL 1DMEDUG]LHMZLGRF]Q\ZSá\Z'PDQQR]\ QD]GROQRĞüGRDGKH]MLRGQRWRZDQRZRGQLHVLHQLXGRV]F]H-SXE. coli/)XNWyUHJRSR]LRPDGKH]MLEH]REHFQRĞFL'
PDQQR]\ Z\QRVLá FIXPOî QDWRPLDVW W\ONR FIXPOî Z REHFQRĞFL 'PDQQR]\ &R FLH- NDZHV]F]HS8&NWyU\QLHSRVLDGD¿PEULLW\SXZ\-ND]DáDGKH]MĊQDNRPyUNDFK]DVW\PXORZDQ\FKQDSR]LRPLH FIXPOî :\QLNWHQPLDá]ZLą]HNQDMSUDZ- GRSRGREQLHM]MDNLPĞLQQ\PF]\QQLNLHPZLUXOHQFMLNWyU\SR-VLDGDWHQV]F]HSQS]DP\ORLGRZ\PL¿PEULDPLVSLUDOQ\PL
: WHĞFLH LQZD]ML GZD ] F]WHUHFK EDGDQ\FK V]F]HSyZ
E. coli Z\ND]Dá\ Z\ĪV]ą ]GROQRĞü ZQLNDQLD Z JáąE
VW\-PXORZDQ\FK NRPyUHN QDEáRQND MHOLWD JUXEHJR Z SRUyZ-QDQLX GR NRPyUHN QLHSRWUDNWRZDQ\FK XSU]HGQLR 71)Į 7DEHOD 6]F]HS\G]LNLH/&RUD]8&ZREHFQR-ĞFL 'PDQQR]\ E\á\ LQWHUQDOL]RZDQH SU]H] VW\PXORZDQH
NRPyUNLQDEáRQNDQDSR]LRPLHQLĪV]\PZSRUyZQDQLXGR NRPyUHNQLHVW\PXORZDQ\FK 5\F :PHWRG]LHF\WRPHWULLSU]HSá\ZRZHMQDGHNVSUHVMĊF]ą- VWHNDGKH]\MQ\FK&($&$0]DREVHUZRZDQRZSU]\SDG-NXV]F]HSyZ/)RUD]8&-HGQDNĪHMHMSR]LRPQLH E\áZ\VRNLLZ\QRVLáRGSRZLHGQLRRUD]ZSRUyZ-QDQLXGRNRQWUROLGRGDWQLHM3R]RVWDáHEDGDQHV]F]HS\QLH Z\ND]Dá\QDGHNVSUHVMLF]ąVWHN&($&$0QDSRZLHU]FKQL NRPyUHNQDEáRQND
OMÓWIENIE I WNIOSKI
: SU]HSURZDG]RQ\FK EDGDQLDFK XGRZRGQLRQR XG]LDá ¿PEULL W\SX Z SURFHVLH DGKH]ML GR QDEáRQND MHOLWD F]áR- ZLHND:LDGRPRĪH¿PEULHWHEĊGąFHF]\QQLNLHPZLUXOHQ-FML V]F]HSyZ $,(& UR]SR]QDMą UHFHSWRU *3, ]DNRWZLF]R-Q\ Z F]ąVWHF]FH &($&$0 NWyUHM QDGHNVSUHVMĊ ]DREVHU- ZRZDQRXSDFMHQWyZ]FK/&:Z\QLNX]QLV]F]HĔGRNWy- U\FKGRFKRG]LQDGURG]HUHODFML&($&$0±$,(&VąXZDO-QLDQH GXĪH LORĞFL71)Į %DGDQLD ]GROQRĞFL DGKH]ML Z\ND-]Dá\Z\ĪV]\SR]LRPDGKH]MLQDNRPyUNDFKVW\PXORZDQ\FK XZV]\VWNLFKEDGDQ\FKV]F]HSyZ3RWZLHUG]RQRWRZEDGD-QLDFKZ\NRQDQ\FKSU]H].RUF]RZVNLHJRLZVSZNWyU\FK ]DVXJHURZDQR ĪH VHNUHFMD 71)Į Z EáRQLH ĞOX]RZHM MHOL-WDMHVW]ZLą]DQD]RVWU\PSU]HELHJLHP,%'RUD]REHFQRĞFLą ]LDUQLQLDNyZFKDUDNWHU\VW\F]Q\FKGODFK/&>@3R]LRPDG-KH]ML SR ]DEORNRZDQLX ¿PEULL W\SX ± PLPR ĪH GUDVW\F]-QLHVSDGáZSRUyZQDQLXGRV\WXDFMLZNWyUHMEORNRZDQLDQLH Szczep E. coli Poziom inwazji (cfu/ml×104)±SDBez D-mannozy Z D-mannozą
Bez TNF-α Z TNF-α Bez TNF-α Z TNF-α LC15/1 1,28±0,33 2,00±2,06 1,01±0,33 0,84±0,26 UC32/2 0,92±0,40 1,05±0,5 1,07±0,53 0,39±0,19 LF82 10,9±2,83 45,6±8,88 7,49±0,82 36,4±14,4 K12 0,49±0,19 1,75±0,66 0,27±0,18 1,90±0,65 2,25E+07 1,75E+07 1,25E+07 7,50E+06 2,50E+06 LC15/1 UC32/2 LF82 K12
TNF-α
A
dhezja (cfu/ml)
Ryc. 3. Poziom adhezji (cfu/ml) badanych szczepów do stymulowanej TNF-α oraz niestymulowanej zróżnicowanej linii Caco-2 w obecności D-mannozy. wanych linii Caco-2 stymulowanych i niestymulowanych TNF-α.
6,0E+0,5 5,0E+05 4,0E+05 3,0E+05 2,0E+05 1,0E+05 0,0E+00 LC15/1 UC32/2 LF82 K12
TNF-α
BM M BM M BM M BM Min
wazja (cfu/ml)
Ryc. 4. Poziom inwazji (cfu/ml) badanych szczepów do stymulowanej TNF-α oraz niestymulowanej zróżnicowanej linii Caco-2 w obecności i nie-obecności D-mannozy. VWRVRZDQR±E\áZ\ĪV]\UyZQLHĪZSU]\SDGNXNRPyUHN]D- VW\PXORZDQ\FKF]\QQLNLHPPDUWZLF\QRZRWZRUX2EQLĪH-QLHVLĊSR]LRPXDGKH]MLEDGDQ\FKV]F]HSyZE. coliZREHF- QRĞFL'PDQQR]\SRWZLHUG]DVXJHVWLĊĪHLQWHUDNFMHSRPLĊ- G]\¿PEULDPLW\SXV]F]HSX$,(&DHQWHURF\WDPLXSDFMHQ-WyZ]FKRUREą/HĞQLRZVNLHJR&URKQDQDVWĊSXMąSU]H]UHV]W\ PDQQR]RZH]QDMGXMąFHVLĊZV]F]\WRZHMF]ĊĞFLHQWHURF\WyZ :EDGDQLDFK%DUQLFKDLZVSQLHZ\ND]DQRNRUHODFMLSR-PLĊG]\ SR]LRPHP DGKH]ML V]F]HSX /) D SR]LRPHP HNV-SUHVMLF]ąVWHN&($&$0>@:EDGDQLDFKSU]HGVWDZLRQ\FK ZQLQLHMV]HMSUDF\ZVND]DQRĪHV]F]HSWHQSRVLDGD±ZSR- UyZQDQLX]SR]RVWDá\PLEDGDQ\PLV]F]HSDPL±]GROQRĞüDG- KH]MLQDZ\VRNLPSR]LRPLH:\ND]\ZDáRQUyZQLHĪQLH]QDF]- QLH]ZLĊNV]RQąHNVSUHVMĊUHFHSWRUyZSRZLHU]FKQLRZ\FK&(- $&$0 3RQDGWRW\ONRV]F]HS/)FHFKRZDáVLĊ]GRO- QRĞFLąSU]HĪ\ZDQLDZHZQąWU]NRPyUHNIDJRF\WDUQ\FK3R]R-VWDáH V]F]HS\ QLH SRVLDGDá\ WHM ]GROQRĞFL FKDUDNWHU\VW\F]QHM GODSDWRW\SX$,(&3R]LRPLQZD]MLV]F]HSX/)E\áUyZQLHĪ QDMZ\ĪV]\VSRĞUyGEDGDQ\FKV]F]HSyZ]DUyZQRZSU]\SDG-NXNRPyUHNQLHVW\PXORZDQ\FKMDNLVW\PXORZDQ\FK71)Į :\NRQDQH EDGDQLD VXJHUXMą ĪH V]F]HS\ L]RORZDQH ] SU]\SDGNyZ SU]HZOHNá\FK ]DSDOHĔ SU]HZRGX SRNDUPR-ZHJR X G]LHFL QLH QDOHĪą GR SDWRW\SX$,(& ERZLHP QLH Z\ND]XMąZV]\VWNLFKFHFKFKDUDNWHU\VW\F]Q\FKGODQLHJR :LHOFH SUDZGRSRGREQ\P Z\GDMH VLĊ IDNW ĪH NRORQL]DFMD SDWRJHQQ\PL V]F]HSDPLE. coli ]DF]\QD VLĊ MXĪ Z RNUHVLH
G]LHFLĊF\PDLFKFLąJáDREHFQRĞüZMHOLFLHSRáąF]RQD]H VW\PXODFMą SRGRVWUHJR VWDQX ]DSDOQHJR L VHNUHFMą71)Į LQGXNXMHUR]ZyM]LDUQLQLDNyZ0RĪHWRVSU]\MDüSR]\VND-QLXFHFKSDWRW\SX$,(&
KONFLIKT INTERESÓW: nie zgłoszono.
PIŚMIENNICTWO
1. Barnich N, Carvalho FA, Glasser AL et al. CEACAM6 acts as a receptor for adhe-rent-invasive E. coli, supporting ileal mucosal colonization in Crohn’s disease. J Clin Invest 2007;117(6):1566–1574.
2. Martinez-Medina M, Aldeguer X, Lopez-Siles M et al. Molecular diversity of
Escherichia coli in the human gut: new ecological evidence supporting the
role of adherent-invasive E. coli (AIEC) in Crohn’s disease. Inflamm Bowel Dis 2009;15(6):872–882.
3. Akazawa A, Sakaida I, Higaki S, Kubo Y, Uchida K, Okita K. Increased expression of tumor necrosis factor-alpha messenger RNA in the intestinal mucosa of in-flammatory bowel disease, particularly in patients with disease in the inactive phase. J Gastroenterol 2002;37(5):345–353.
4. Cravioto A, Tello A, Navarro A et al. Association of Escherichia coli Hep-2 adheren-ce patterns with type and duration of diarrhea. Lanadheren-cet 1991;337(8736):262–264. 5. Falkow S, Small P, Isberg R, Hayes SF, Carwin D. A molecular strategy for the
stu-dy of bacterial invasion. Rev Infect Dis 1987;9(5):450–455.
6. Ieta K, Tanaka F, Utsunomiya T, Kuwano H, Mori M. CEACAM6 gene expression in intrahepatic cholangiocarcinoma. Brit J Cancer 2006;95(4):532–540. 7. Hrušák O, Trka J, Zuna J, Housková J, Bartunkova J, Starý J. Abberant expression
of KOR-SA3544 antigen in children acute lymphoblastic leukemia predicts TEL-AML1 negativity. Leukemia 1998;12:1064–1070.
8. Korczowski B, Romańczuk W, Korczowska E. Czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF-α) w nieswoistych zapaleniach jelit. Pediatr Współcz Gastroenterol Hepatol Żyw Dziecka 2000;2(4):297–299.
