UNIVERSITATIS MARIAE GURIE-SKŁODOWSKA LUBLIN — POLONIA
VOL. IX. 4 'SECTIO D. 1954
Z Zakładu Anatomii Patologicznej Akademii Medycznej w Lublinie.
Kierownik: prof, dr med. Stanislaw Mahrburg.
Stanisław
MAHRBURG
Badania nad
wpływem wyciągu
łożyska, sporządzonegometodą
Fiłatowa,na przeszczepialność
i
rozwójmięsaka Crockera u
myszyИсследования над влиянием экстракта плаценты, приготовленного по методу Филатова на прививочность
и развитие саркомы Крокера у мыши
Studies on the influence of placentar extract prepared according to Filatow’s method on the transinoculation and
growth of Crocker’s tumor in the mouse
Ustalenie
ścisłego związku pomiędzy hormonami płciowymi(testosteron, follikulina) a
ciałami nowotworotwórczymiwprowa
dzanymi
doustroju (produkty
smołowcowe: benzopiren,antracen)
pozwoli poznać ciałaczynne
ustrojowe, które mogąwpływać na
wytwarzaniesię
nowotworów. Wpływczynników
zewnątrzpo- chodnychna powstawanie
samoistnychnowotworów
może mieć działanie pośrednie, toznaczy, że
wprowadzony czynnik może wyzwolićw ustroju właściwy bodziec nowotworotwórczy,
albomoże stać
sięjednym
zczynników ułatwiających
przemianęno
wotworową
komórki
podwpływem bodźców
ustrojowych.Można również przyjąć, że
geneza nowotworówpolega
naróżnorodności działania, i że
wwielu przypadkach czynnik
ustrojowy może miećdecydujące znaczenie.
Jakkolwiek
badaniadoświadczalne przemawiają
za istnieniemczynników
nowotworotwórczychwywołujących
uzwierzęcia
wy
twarzanienowotworu, to jednak nie
jestostatecznie ustalone
czy zawszei czy tylko ten
czynnikjest etiologicznie
decydującym.W
dużejwiększości
jednak nowotworówludzkich nie
możemyustalić
żadnegoze
znanych namczynników wywołujących nowo
twory, w tych
przypadkach więc powstawanie nowotworu
możebyć tłumaczone
istnieniembodźców
bliżejnie
znanych lubteż wpływów działających sumarycznie względnie
kumulacyjnie.Terapia hormonalna
nowotworów złośliwych
byłastosowana
od czasów bardzo dawnych,ale
dopieroteraz wkracza na
toryścisłego
poznania. Już wubiegłym
stuleciuobserwowano zanik
gruczołu krokowego po trzebieniu. Późniejsze badaniastwierdzi
ły
ścisłą łącznośćpomiędzy
stanemprzedrakowym
gruczołumle
kowego, a zwiększonym
wytwarzaniem
się follikuliny.Badania
ostatnich latnatomiast zwróciły
uwagęna
celowość wykluczenia czynności jajnikówprzy
raku gruczołu mlekowego,oraz na
do
datni wpływ trzebienia promieniamiRtg w
okresie przerzutów.Jednocześnie dalsze
obserwacjenad polepszeniem wyniku lecze
nia
nowotworów uznały zakonieczność nie tylko hamowanie
czynności jajników,ale
także wykluczenie czynności przysadki, toznaczy obniżenie
czynnościźródeł ciał gonadotropowych.
Bliższe poznanie
udziału
czynnika wewnątrzpochodnegopo
winno
rzucićświatło
na zagadnienie w jakimstopniu ustrój może wytwarzać
bodźcenowotworotwórcze.
Trudno przewidzieć jakimosiągnięciem
praktycznym będą wynikitych
badań, niewątpliwie jednakprowadzą one do poznania
czynnikanowotworotwórczego ustroju i
posiadają dużeznaczenie teoretyczne, a
jednocześnie mogą byćdrogowskazem
dodalszych badań w
tejdziedzinie.
Dla tego też poznanie
tych zagadnień,a
nawetich
pojedyńczychogniw posiada
dużeznaczenie.
Wśród
narządów
wewnętrznego wydzielania najmniej do tychczas
zwracałona siebie uwagę łożysko.
Czynność jego trwakrótko, obejmuje bowiem
okresciąży,
podczas której właściwości biochemicznei
czynności wewnątrzwydzielnicze łożyskasą bar
dzo złożone. W okresie ciąży zachodzi również ścisła zależność i współczynność
gruczołów wewnętrznego wydzielaniaz
łoży skiem,
które wytwarza kompleks hormonów. W drugim i trzecimmiesiącu
ciążyłożysko
produkuje odpowiedniąilość
hormonów jajnikowych (progesteron, estrogen— Ehrhardt), tak, że na
wet
obustronneusunięcie
jajników w tymokresie nie przerywa
ciąży i przebiega
ona normalnie(W aldstein, Nelson,
Arva y i
inni). Hormony zatem wydzielane przez łożysko zdają się być identycznez
hormonami jajnikowymi,co
zresztą potwier
dzają
liczne badania
doświadczalne,przy czym zwracają uwagę,
żefizjologiczne właściwości łożyska
śą różne uróżnych zwierząt.
, Właściwości
wydzielnicze
łożyskanie
ograniczająsię
tylkodo
wytwarzaniagonadotropin, estrogenów i
progesteronu,ale
także produkująz niesterolowych relaksynę.
Badania nad wzmożoną przemianą stereoidów w okresie ciążywskazują, że łożysko pod względem
aktywnościwydzielniczej nie ustępuje
korzenadnerczy.
Aktywność łożyska jest tak
wyraźna, że
nawet otrzymałoono nazwę „narządu
korowo-nadnerczowejadaptacji".
Dodaćnależy,
żegonadotropiny łożyska
sąprodukowane przez komórki
kos-mówki.
Pojawiają się one wustroju kobiecym z chwilą, gdy
za czyna
się rozwójkosmówki,
znikają z moczuz chwilą,
gdy łoży sko
po porodzieopuszcza
ustrójkobiety.
Gonadotropiny zjawiają sięwe
krwii
moczu wokresie ciąży
w drugim tygodniu po owu-lacji, co pozwala
nawczesne rozpoznanie
ciąży(Aschheim,
Zondek,Friedman).
Ilość
hormonów
gonadotropowych ulegastałemu postępujące
mu
zwiększaniu i osiąga największe nasilenie
wokresie
przedpo
rodowym,znika natomiast
dość gwałtownie poporodzie
(Evans, Zondeki inni). Jak wykazały badania
Aschheima, Zen
deka,
Arona i
innych głównym narządemprodukującym
te olbrzymieilości gonadotropin,
jakiewidzi się w
czasieciąży, jest
łożysko,mimo iż
nie możnawykluczyć
udziałuprzysadki mózgowej.
Olbrzymiaaktywność łożyska
w kierunku wy
twarzania hormonów gonadotropowychznalazła
potwierdzenie w całym szeregu faktów, którewskazują,
że poniekompletnym
poronieniuwytwarzanie
hormonównie ustaje,
aguzy
tkanek za
rodkowych (chorionepithelioma)utrzymują
wysokipoziom
gona dotropiny we krwi. Inne obserwacje stwierdzają, że rozrodcze i
przerzutowe czynności procesów nowotworowych wyrażająsię
skaląwydzielniczą
hormonów.Zniszczenie tkanki nowotworowej przez zabieg
operacyjny lub działaniem radu powodujezniknięcie
hormonówz moczu
ikrwi.
Takżedowodem
czynności wydzielni
czejłożyska
jest fakt,że
części łożyskai
tkanek kosmówki (zciąży pozamacicznej) rosną na
pożywkachi
wydzielają hormo ny
przez okres od2
do7
miesięcy.Przytoczone
faktywskazują więc, że łożysko
posiadazastępczą zdolność
wydzielania estrogenui
progesteronu, a równocześnie wzmacnia czynności jajników.Biorąc
więc
poduwagę Wspólnotę cech
biochemicznych iczyn
nościowych
jednych i
drugichhormonów gonadotropowych,
możnaprzypuszczać istnienie pewnego wpływu
hormonów łożyska na przebieg procesównowotworowych.
Opierając się natych przy
puszczeniach
podjęliśmy próbę badańdoświadczalnych nad
dzia łaniem
wyciągówz
tkanek łożyska na przeszczepialnośći rozwój
nowotworu
u
myszy.Materiał
i metodyka
badańWyciągi
z tkanek łożyskamyszy wstrzykiwano
myszom przed zaszczepieniem nowotworu.Metoda
sporządzania wyciągu z tka nek
łożyska stosowana w naszychdoświadczeniach, różniła
się od zwykleużywanych metod
otrzymywania wyciągówz tkanek i
narządów, które posługująsię płynami o silnych
własnościach ekstrakcyjnych, a mianowicie:chloroformem, benzenem,
produk tami
naftowymi,eterowymi i innymi.
Przysporządzaniu
wyciąguz
łożyska myszyzdecydowaliśmy nie używać
płynów drażniących pośrednio lub bezpośrednio, azastosować
jedynie sposób metodyFiłatowa.
Ciężarne
myszy, wwieku 90
—110 dni, w
drugiej połowie ciąży,dekapitowano, płody usuwano i
zjałowo
wypreparowa
nychłożysk
sporządzano wyciąg.Sposób przygotowania wyciągu
był następujący: tkankęłożyska
(30 g) przechowywanoprzez
tydzień w temperaturze 2—
4°C,poczym przecierano
i rozcieńcza
no10-krotną ilością wody
destylowanej. Zawiesinępozostawiano
przez jedną godzinę wtemperaturze pokojowej,
następnieogrze
wano na łaźni wodnej w temperaturze +
70
cC przez jednągodzinę,
a po przesączeniuprzez
bibułę filtracyjnąogrzewano w dalszym ciągu
na łaźni wodnej wtemperaturze
+70°C przez jedną godzinę.Tę
ostatniączynność
powtarzanoprzez
trzy kolejnedni.
Wyciąg
z łożyska stosowano w postaci podskórnych zastrzy
ków.I
serii30
myszywstrzykiwano
wyciągz
łożyska w ilości 0,04 ml,co trzeci
dzień. Ogólniewykonano
15zastrzyków. Na
10dzień
po ostatnimzastrzyku
transplantowano podskórnie w okoli
cę grzbietowąroztartą
tkankę nowotworumięsaka
Crockera.II
serii
myszykontrolnych
transplantowanoten
samnowotwór
wtej samej
postaci, bezuprzednich wstrzykiwan wyciągu łożyska.
Do
doświadczeń
były używane wtej samej ilości samce
i samice białych
myszek,własnej
hodowli, niskorakowe (mniej
niż
0,5%
samoistnych nowotworów).Materiał
doprzeszczepień nowotworu był
pobrany od 4myszy z nowotworowymi guzami
mięsaka Crockera, Materiałbył przygotowany jednakowo
dlaobu
grupi
przeszczepiany jednocześnie i wjednakowych ilościach.
W okresie wstrzykiwań wyciągów
łożyskamyszy zachowywa
ły się normalnie, przyjmowały
pokarm chętniei stan ten
trwałdo chwili
wytworzeniasię u nich guzów nowotworowych znacznej wielkości.
Omówienie wyników badań
i wnioskiPo
trzech
dobachod chwili
przeszczepienia nowotworuobu grupom myszy doświadczalnych,
w grupie„łożyskowej" nowotwór wielkości
ziarnagrochu wytworzył
sięu
25 myszy, podczas gdy wgrupie kontrolnej
w tym samymdniu stwierdzono guzki no
wotworowe
zaledwie
wyczuwalnetylko
u4
myszek.Po 10 dobach
(tablica, dzień 21.
IV) nowotwórw
grupie„łożys
kowej"
powiększa się
z dniana dzień,
dochodzącdo
wielkości dużego bobu. W tym okresie w grupiekontrolnej
nowotwórpow- staje jeszcze u 10-ciu myszy, jednak wielkość guzów
u tych myszy jest znaczniemniejsza (tabi. dz.
2.V).W
dalszym przebiegu doświadczenia guzy wgrupie „łożysko
wej" rosną bardzo szybko, a
na 11 i
15 dzień poprzeszczepieniu
dochodzą dowielkości orzecha
włoskiego (tabl. dz. 23—26.IV.),
w grupiekontrolnej natomiast
wtym
okresie widocznesą guzki ledwo
wyczuwalneu
10myszy,
awkrótce jeszcze
u6-ciu,
cołącznie stanowi
20 myszykontrolnych z guzkami nowotworowy
mi
wielkościziarna grochu
(tabl. dz. 2.V.).W
15dniu
poprze
szczepieniu w grupie myszy
„łożyskowych"
jednapada
zguzem wielkości jaja
kuryi drugim mniejszym,
apo
dalszych7 dniach z tejże grupy
padają następne 3myszki (tabl.
dz. 2.V.i 5.V.I. W
tymokresie
guzy grupykontrolnej
rosną bardzopowoli i
dopiero na30 dzień
poprzeszczepieniu dochodzą
dowielkości wiśni i
bobu.U myszy „łożyskowych" guzy nowotworowe
rosnąw dalszym ciągu szybko i
dochodzą do wielkościśredniego i dużego
jaja kurzego zajmującniemal
całą grzbietowąpowierzchnię zwierzę
cia.
Około
20 dnia odzaszczepienia
myszy grupy„łożyskowej" za
czynają
padać. Guzysą
dużei
twarde,nie stwierdzono
w nich rozmiękaniai ropienia.
U 4myszy tej grupy
zauważonoprzerzuty
do jamy
brzusznej, au
kilku innych wmiejscu
przeszczepuzja
wiło się
nagrzbiecie kilka mniejszych
guzków.W grupie kontrolnej
na30—
38dzień
padło 2myszki (tabl.
dz.
20. 24 i
26.V., 3.VL).Guzy
tychmyszek były znacznie
mniej sze
wporównaniu
z guzami grupy „łożyskowej',przy czym były
one wstanie rozpadu i
ropienia, ato pozwalało
przypuszczać, że bezpośrednią przyczynąśmierci mogło być ogólne
zakażenie.W drugiej połowie doświadczalnego okresu
guzy myszek„łożyskowych" • były duże, tkanka
nowotworowatwarda i zbita.
Mimo
dużych rozmiarów
wżadnym przypadku nie obserwowano
rozmiękania.Myszy
padały w staniewielkiego
wyniszczenia, lub w takimstanie były
dekapitowane.Okres
życiamyszy
„łożysko wych" był bardzo różny,
częśćich padła
wpierwszej
połowie okre su
doświadczalnego, inne przeżyły około 80 dni odprzeszczepienia
nowotworu.W
dalszymprzebiegu doświadczenia
odróżniającą cechągru
py kontrolnej był powolny
rozrost nowotworui znacznie mniejszy rozmiar
guzów w zestawieniu z guzami grupypierwszej, które
niejednokrotnie zajmowały,jak wspominaliśmy,
całąpowierzchnię grzbietową i
byływiększe
od zwierzęcia.Wszystkie
guzygrupy kontrolnej cechował
wczesny rozpad tkankinowotworowej i
ro pienie.
Okresżycia myszy
grupykontrolnej
był dłuższy.Najwię
cej
myszek padło
pomiędzy100—120
dniem, a ostatniedekapito- wano
w180 dniu
od przeszczepienia nowotworu.W
przeprowadzonych doświadczeniachzwraca uwagę
wyraź
naróżnica
siłprzeszczepialności
nowotworów w obugrupach:
na 30 myszy w
grupie
„łożyskowej" nowotwór przyjąłsię
u 25, wgrupie kontrolnej
natę
samą ilość nowotwórpowstał
zdużym opóźnieniem
u 20. Należywątpić czy
tęróżnicę
przy tych samychwarunkach
doświadczalnych itym
samymmateriale
przeszczepia
nym możnazaliczyć tylko do
wyników przypadkowych. Wgrupie kontrolnej
wżadnym przypadku nie stwierdzono
przerzutówno
wotworowych i
zmian w jamie brzusznej
wpostaci płynu krwi
stego.
Obserwacje nasze wyraźnie wskazują zatem
nadodatni
wpływ zastrzykówwyciągu
łożyska na siłę przeszczepialności irozwój
mięsaka Crockera.W naszym
doświadczeniu zwracatakże
uwagęszybkość
wzrostu nowotworu w grupie„łożyskowej".
Podwóch ty
godniach u 25
myszy tej grupy
nowotwórdochodził do
wielko
ści
orzecha włoskiego,
podczas gdy w grupiekontrolnej
tylko4
myszy mają guzywielkości
wiśni. Wdalszym przebiegu
do świadczenia
różnice rozmiarówguzów
nowotworowych zaznacza ją
się jeszcze bardziej,poza tym myszy
„łożyskowe 'z
bardzodu
żymi
guzami
zaczynają padać już w 15dniu
doświadczenia.Wreszcie zwraca uwagę
różnica okresu życiamyszy doświadczal
nych: w
grupie „łożyskowej"
myszy padają począwszyod
15 do80
dniaz objawami wielkiego wyniszczenia,
podczas gdy wgrupie kontrolnej
okrespadania zaczyna
się od 30 dniai trwa
do113.
Tablica
ZASTRZVtl 7WVLIACC ŁOŻYSKA CO 5DNI РА7ГЛЛ1Б1 „
,
ppzłewa 10 CMI---
1 hONTEOLNE ira SZCZEPIONY NOWOTWOP SAP СОМА СР0СЮА MtlHUitlllittiltlHHHIHHih
UIHUHUUUHUIUHHHH
ьЛШ<4Н4444<44Ш4444444444Ншшштм *
u»
HUtUUU444444i44HHUUH
iiHUiiHiiHuuuumum НШННШШ4444Н4444Ш44 uiuiiiiiuiimiHuiiUiuâ
ШИШШ1ШШНШШ4Ш H444HI44444t444444HUiiUH 44444444444444444444ННННН444444444<44444U44<HU44MU
шшншшшшиишт iUUlUiUlUUUUIHUüUI UUUUUUUiłiUUUiUih4444444444444444444444444414
‘М4444444444444444444444444
жшшшшшннши
«и — —> ми ,м ---- ---- *
Na
podstawie uzyskanych
wyników w naszych doświadcze
niach można sądzić, żetkanka
nowotworowa umyszy „łożysko
wych" znalazła bardzo sprzyjające warunki rozwoju.
Zaznacza się
to tym wyraźniej,że
rozrost mięsakaCrockera na podłożu
dowol nie
wybranejmyszy ma przebieg powolny
i ulegarozpadowi, na
tomiast ustrój myszy po
zastrzykach wyciągu
łożyska stwarzapodłoże ułatwiające powstawanie i
szybki rozrost tkankinowo
tworowej nie
mającejskłonności
dorozpadu.
Badania naszenie wykazują dostrzegalnych różnic
pomiędzysamcami
isamicami, na podstawie tego można sądzić,
żewyciąg
łożyska wpływa jed nakowo na
obiepłcie.
Badania mikroskopowe
nie wykazały wyraźnych różnic
histo logicznych w budowie
nowotworów obu grup doświadczalnych.Obrazy
szeregu preparatów
pozwalają jednak wnioskować, żeu myszy „łożyskowych"
tkanka nowotworowacharakteryzuje się większym
stopniemrozpadu,
przedewszystkim
jąder komórko
wych;produkty
rozpadu jąder wypełniająccytoplazmę prowadzą
do jejrozpadu. W obrazie histologicznym nie widzi się
typowychfigur
podziałujądra, w przeciwieństwie
dopreparatów z grupy
kontrolnej, które potwierdzają szybkiedojrzewanie komórki no
wotworowej prowadzące
do
rozrostui rozpadu
guza.Zastosowany przez
nas
wyciągz
łożyskaprzygotowany
we
dług metodyFiłatowa daje zupełną
pewnośćuniknięcia wpływów substancji
ubocznych wprowadzonych doustroju
myszy razemz wyciągiem. Metoda nasza
różnisię od
dotychczas stoso wanych
wtechnice
onkologicznejsposobów przygotowania
wy
ciągówz
tkanek lubsubstancji nowotworotwórczych. Dotychczas
stosowanemetody nie wykluczały
wpływów związków ubo
cznych,'a
przezto
uniemożliwiaływyprowadzenie
dokładnychwniosków.
Metodaprzygotowania
wyciągu z łożyska zastosowa
naw naszym doświadczeniu zasługuje na
uwagę,gdyż
wskazuje na możliwość otrzymania czynnychsubstancji, o
charakterzehor
monalnym,
w postaci zupełnieobojętnych
związków.Występujące
różnice
siłyprzeszczepialności i
rozrostu nowo tworu
podwpływem
wyciąguz
łożyskaświadczą
o istnieniu czynnikówwyzwalających
u zwierzęcia wzmożonąwrażliwość na
działaniebodźca nowotworotwórczego. Należy
przypuszczać,że
czynnikiem wywołującymodmienność cech
nowotworowychsą
wprowadzoneprzy
szczepieniuwyciągiem z
łożyska, hormony, którewytworzyły specjalną ekspozycję
ustrojową na zadziałanie bodźcazewnętrznego.
Prawdopodobnie substancje
nowotworotwórczesą stale
wy
twarzane
wustroju i
stanowią jego fizjologiczne składniki, które na normalnetkanki nie
mają ujemnegowpływu.
O ile jednak substancje te są wytwarzane wnadmiernej
ilości,lub
zostanąwprowadzone
do ustroju w nadmiernej ilościustrój staje
się wraż
liwyna wszelkie bodźce nowotworotwórcze.
Tę nabytą
wrażliwośćprawdopodobnie
wywołaliśmy wna
szych
doświadczeniach
wprowadzając wyciąg z łożyska obfitującyw czynne hormony.
Powstaćwięc
może pytanie:czy nasze
obser wacje nad działaniem wyciągu
złożyska
nanowotwór
mogą łączyćsię
zprocesami biochemicznymi
zachodzącymi u człowieka wchorobie nowotworowej.
Ustrój wytwarza
w
swychtkankach substancje
nowotworo
twórczew
postacicholesterolu
oraz pokrewnych związków,jak
np. kwasucholowego,
follikuliny,testosteronu.
Związkite
sąprawdopodobnie częściowo
wydzielanez
ustroju,częściowo ule
gają
rozłożeniu
nazwiązki
prostsze, po przejściuprzez szereg
związkówpośrednich.
Można przypuszczać, żejeśli wytwarza się nadmiar
tychzwiązków
wustroju, fizjologiczna ich
koncentracjamoże stać się
wystarczającą dowywołania nowotworowego
prze
obrażenia komórekwrażliwych
na ich działanie.Znany
jestszereg bodźców wyzwalających nowotwory,
brakjednak
znajomości przebiegubiochemicznych
procesówprowa
dzących
dowystępowania
nadmiernejilości substancji
nowotwo-rotwórczych wywołujących
nadwrażliwośćtkanek na
schorzenia nowotworowe.Poznanie tych
procesów ma
zasadnicze znaczenie.Wyniki naszego
doświadczeniarzucają światło na
to zagadnienie.Czy
substancje
hormonalnewytwarzające
się okresowo wustroju
kobiety sącałkowicie wydzielane,
czyzostają
oneprze
kształcone
w innepochodne
związki, w jakiejilości mogą one
pozostawać w ustroju, czy mogą byćkumulowane,
czywreszcie mogą
one miećwpływ
nastany predyspozycyjne
w przekształca
niusię tkanek
wnowotwory,
są to zagadnieniadla
badańprzy
szłych.
PIŚMIENNICTWO
1. Endocrinology of neoplastic diseases. Symposium by eitheen authors. 1947.
2. F r i e d m a n M. H., Lapham M. E.: Am. J. Obstr. a. Gynec. Vol. 21, 3405. 1931.
3. G r o 11 m a n A. : Essentials of Endocrinology.
4. Iwanow I. I., Mardaszow, C. P., Zabrski В. I.: Biołogiczeskaja chimia. Moskwa. 1951.
5. Recent progress in hormon research. Vol. I. 1947, Vol. VI. 1951.
6. Zondek B., Aschheim S.: Klin. Wochenschft. 6. 248. 1927.
P E
3 IO M E
Автор
исследовал влияние
вытяжки плацентыбелых
мы
шей,приготовленной методом
Филатова напрививку
и развитие саркомы Crocker’a. Исследования автора показывают,
чтовы
тяжка
плаценты
увеличивает прививку иразвитие новообразо
вания у
мышей и
придает опухолинесколько
иной характер.Исследования
автора имеюттакжеи это значение, что
онпер
вый
приметил приготовление тканевой вытяжки
методомФила
това как активного субстракта.
SUMMARY
The
author’s investigations
concernthe influence of placentae
extractprepared by the
methodof Filatow
onthe
transinocu lation
and developementof Crocker's tumor
(Crocker’
s sarcoma)in the mouse.
These researches showed an
increase of the
transinoculative strength andof the growth of
thistype of
tumor incomparison
with thecontrol group.
The author
’s
resultsof investigations should
betaken under consideration because of the fact
of applyingcancerogenes
prepa rations for the
firsttime
byFilatow’s method.
Papier bezdrz. Ill kl. 80 g. Format 70x100 Ark. druku 10 str.
Annales U. M C. S. Lublin1954 Lub. Druk. Pras.—Lublin, Buczka 12. Zam. Nr 2352 27.V1II.54 r.
825 egz. A-5-27267 Data otrzymania manuskryptu 27.VI1I.54. Data ukończenia druku 10 XI 54 r.