Przygotowanie próbek Skórki cytrusów
Do badania należy przygotować fragment skórki o powierzchni 3 – 6 cm².
Za pomocą noża oddzielić albedo od flawedo.
Flawedo pokroić w paski o szerokości < 2 mm a następnie paski pokroić w drobną kostkę.
Nasiona i suchy materiał roślinny
Około 1 g próbki rozetrzeć w moździerzu.
Ekstrakcja
Próbkę przenieść do strzykawki, w strzykawce umieścić tłok i ścisnąć próbkę tak, aby wycisnąć z niej sok.
Na szalkę Petriego lub do małej zlewki wlać 2 –3 cm³ octanu etylu.
Pobrać rozpuszczalnik z szalki do strzykawki.
Ekstrakcję prowadzić wytrząsając zawartość strzykawki z rozpuszczalnikiem przez ok. 1 minutę lub przez kilkukrotne przetłaczanie rozpuszczalnika / ekstraktu między szalką a strzykawką.
Ekstrakt przenieść na szalkę Petriego i pobrać za pomocą drugiej strzykawki przez filtr strzykawkowy.
Usunąć filtr ze strzykawki.
Jeżeli w ekstrakcie znajduje się woda widoczna w postaci kropel (nastąpiła separacja faz), to należy ją usunąć (odwrócić strzykawkę tłokiem w górę, postukać, tak aby krople wody opadły na dół i
wycisnąć).
Przefiltrowany ekstrakt przenieść do fiolki i w razie konieczności uzupełnić rozpuszczalnikiem (octanem etylu).
Filtr strzykawkowy oczyścić z cząstek stałych przepuszczając przez niego pozostały w strzykawce ekstrakt. W trakcie płukania filtra w przeciwnym kierunku należy naciskać na tłok strzykawki przyciskając jednocześnie filtr do stożka strzykawki.
Strzykawkę po odfiltrowanym ekstrakcie i filtr wypłukać czystym rozpuszczalnikiem.
Analiza
Fiolki z próbkami umieszcza się w automatycznym dozowniku.
Na kolumnę chromatograficzną dozuje się1 µl próbki.
Widma analitu rejestruje się w zakresie 35 – 550 m/z.
Na podstawie zarejestrowanych widm dokonuje się półautomatycznej identyfikacji związków korzystając z dostępnych baz.
Na podstawie całkowitego prądu jonowego (TIC) określa się przybliżoną względną zawartość poszczególnych związków.
Sprawozdanie
Sprawozdanie powinno zawierać:
Krótki(!) wstęp – co było celem i co wykonano (opis sposobu sporządzenia próbek, nie całą procedurę jak wyżej).
Warunki analizy (aparat, kolumna chromatograficzna, program temperaturowy, temperatura dozownika, energia jonizacji).
Uzyskane wyniki w postaci tabeli zawierającej zidentyfikowane związki, ich czas retencji i dodatkowe informacje (np. klasyfikację, charakterystyczne jony, ilość).
Podsumowanie i wnioski.
